現(xiàn)代病原生物學(xué)研究技術(shù)

內(nèi)容概要

本書是一本比較全面的病原生物學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)用書。書中主要涉及現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)、分子生物學(xué)技術(shù)、免疫學(xué)技術(shù)、遺傳與進(jìn)化技術(shù)，以及基因組、蛋白組、轉(zhuǎn)錄組、代謝組等組學(xué)技術(shù)。

書籍目錄

第一章 核酸的分離與純化
第二章 目的基因的獲取
第三章 基因的擴(kuò)增及鑒定
第四章 基因的克隆與鑒定
第五章 基因的表達(dá)與分析
第六章 表達(dá)產(chǎn)物的分離、純化與鑒定
第七章 蛋白質(zhì)功能
第八章 芯片技術(shù)
第九章 組學(xué)技術(shù)
第十章 基因多態(tài)性及種群遺傳
第十一章 免疫學(xué)技術(shù)
第十二章 疫苗研究
第十三章 診斷技術(shù)
第十四章 轉(zhuǎn)基因技術(shù)
第十五章 微生物培養(yǎng)技術(shù)
第十六章 寄生蟲培養(yǎng)技術(shù)
第十七章 寄生蟲病傳播模型的構(gòu)建技術(shù)
第十八章 生態(tài)學(xué)研究技術(shù)
第十九章 監(jiān)測(cè)技術(shù)
第二十章 預(yù)防控制效果評(píng)價(jià)技術(shù)
第二十一章 其他技術(shù)
第二十二章 動(dòng)物模型

章節(jié)摘錄

　　通?？刹捎眉?xì)胞或組織中的全蛋白質(zhì)組分進(jìn)行蛋白質(zhì)組分析，也可以進(jìn)行樣品預(yù)分級(jí)，即采用各種方法將細(xì)胞或組織中的全體蛋白質(zhì)分成幾部分，分別進(jìn)行蛋白質(zhì)組研究。樣品預(yù)分級(jí)的主要方法包括根據(jù)蛋白質(zhì)溶解性和蛋白質(zhì)在細(xì)胞中不同的細(xì)胞器定位進(jìn)行分級(jí)，不僅可以提高低豐度蛋白質(zhì)的上樣量和檢測(cè)，還可以針對(duì)某一細(xì)胞器的蛋白質(zhì)組進(jìn)行研究。（一）蛋白質(zhì)的提取進(jìn)行樣品制備時(shí)，首先要明確其研究目的。研究目的是獲得盡可能多的蛋白，還是所感興趣的某些蛋白；是要求全蛋白表達(dá)譜，還是可重復(fù)的清晰圖譜；是需要讓蛋白變性后進(jìn)行雙向電泳，還是需要保持蛋白質(zhì)的活性。目的不同，蛋白質(zhì)提取液的成分就不同。如更注重保持蛋白質(zhì)的活性，則需用等緩沖液；要進(jìn)行雙向電泳，提取液就需含強(qiáng)變性劑等成分?！　?.組織細(xì)胞破碎有些蛋白質(zhì)分泌于細(xì)胞外，用適當(dāng)?shù)娜軇┛芍苯犹崛。挥行﹦t存在于細(xì)胞內(nèi)，這類蛋白質(zhì)又有游離蛋白質(zhì)和結(jié)合蛋白質(zhì)之分，前者游離在細(xì)胞質(zhì)中，后者則與細(xì)胞器緊密結(jié)合。欲抽提存在于細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)時(shí)，首先應(yīng)將組織細(xì)胞粉碎以便抽提。細(xì)胞破碎主要采用機(jī)械裂解和化學(xué)法，兩者聯(lián)合有協(xié)同作用，可盡可能地溶解和解聚蛋白。此外細(xì)胞破碎時(shí)會(huì)逸出蛋白酶，處理過程中添加PMSF等蛋白酶抑制劑可保持蛋白的完整性。同時(shí)，操作應(yīng)盡量在低溫條件下進(jìn)行，所使用的溶液最好先經(jīng)過預(yù)冷處理?！　。?）機(jī)械破碎：包括研磨法、機(jī)械勻漿法、超聲破碎法、壓力杯法、凍融裂解法和滲透溶胞法等?！　?）研磨法：研磨法是最常用的組織細(xì)胞破碎方法。將細(xì)胞組織置研缽中，研磨成粉末。為了提高研磨效果，可加入少許石英砂研磨。采用勻漿器也能把細(xì)胞破碎，此法多用于實(shí)驗(yàn)室?！　?）機(jī)械勻漿法：這類方法一般較為劇烈，用組織搗碎器（8000～10000r／rain）或電動(dòng)勻漿器處理可將細(xì)胞破碎。但機(jī)械勻漿時(shí)須保持低溫環(huán)境，以防溫度升高引起蛋白質(zhì)變性，且時(shí)間不宜過長(zhǎng)?！　?）超聲破碎法：是借助聲波的震動(dòng)力破碎細(xì)胞的有效方法。為了防止電器長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)轉(zhuǎn)產(chǎn)熱過多，樣品處理應(yīng)在冰浴中進(jìn)行，并采用間歇處理的辦法，即超聲處理10秒后放置10秒，然后再超聲處理，如此反復(fù)1～2分鐘。用超聲波處理細(xì)菌和酵母菌懸液時(shí)，時(shí)間可適當(dāng)延長(zhǎng)。　　……

圖書封面

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