出版時間:2009-1 出版社:化學工業(yè)出版社 作者:劉森 編 頁數(shù):254
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前言
生物制品是人類用于預防、治療和診斷疾病的有力武器,這些由微生物(細菌、噬菌體、立克次體、病毒等)或微生物代謝產物、動物毒素、人或動物主要組織經純化或現(xiàn)代生物技術加工制成的產品,在預防人類各種傳染性疾病、治療或者輔助治療數(shù)種疾病方面發(fā)揮了重要作用,取得了良好的效果,提高了人類的健康水平。隨著時代變遷、經濟發(fā)展,人類賴以生存的大環(huán)境和微環(huán)境逐步惡化,近30多年來,全球新發(fā)現(xiàn)的致病性病原體有40余種,其中一些病原體仍在人間傳播,肆虐人類健康,如人類免疫缺陷病毒HIV、變異冠狀病毒、高死亡率埃博拉病毒等;還有一些在不同物種間相互傳播的病原體,如高致病性禽流感H5N1病毒、引起動物和人腦疾病的朊病毒等都對當今和未來人類的健康構成了嚴重威脅。目前對這些主要的病原體及其造成的疾病,尚未尋找到有效的預防和治療方法。盡管如此,人們仍在不斷探索解決這些問題的辦法。人類都寄希望于用生物制品來預防和治療某些疾病。疫苗是目前人類可以徹底控制某一傳染性疾病的唯一武器,預防接種不但保護了個體免受傳染病病原體的侵襲,而且在群體中也限制了病原微生物的傳播;同樣,診斷試劑的應用也在疾病預防中發(fā)揮重要作用。疫苗在消滅天花和控制脊髓灰質炎等傳染病中所起到的關鍵性作用有力地證明了這一點。因此,生物制品的研究開發(fā)成為了疾?。ㄌ貏e是傳染性疾?。╊A防及控制的重要內容。幾乎所有的疫苗和絕大多數(shù)生物制品在研究、生產及檢定過程中都離不開細胞培養(yǎng),由于組織細胞,特別是來源于動物的原代細胞,可能帶有外源性的微生物,會給研究結果的可靠性、生產產品的安全性等帶來影響,因此必須對用于生產及檢定用的細胞進行檢測,確定其達到相關技術標準的要求,保障所生產制品的安全。因此,建立準確、靈敏、可靠、重復性好的檢測方法及標準,對于保障產品的質量至關重要。我國已發(fā)布了相關的法律法規(guī)和藥典,對不同環(huán)節(jié)的檢測項目﹑控制標準都制定了基本要求。鑒于目前國外檢測技術的不斷完善,國內生物制品企業(yè)日趨增多,編寫一部有關生物制品的質量檢定手冊非常有必要。本書邀請了一批具有扎實理論基礎并在生物制品工作中積累了豐富經驗的專家學者,根據(jù)《中華人民共和國藥典》本書后文簡稱《中國藥典》。(三部)中《生物制品生產用動物細胞基質制備及檢定規(guī)程》的基本要求,結合一些工作經驗,編寫了《生物制品檢定手冊——生產及檢定用細胞》一書供同行參考。本書較全面地描述了生物制品生產及檢定用細胞的種類﹑生長特性﹑培養(yǎng)方法﹑檢測內容﹑操作程序﹑判斷標準等內容。希望能對同行有所幫助,也希望通過本書的出版,加強生物制品界的交流與合作,為研究新生物制品、檢定制品的質量共同努力。由于科技發(fā)展日新月異,我們掌握的資料和撰寫的水平都還有待提高,另外該書編寫時間緊,不妥和疏漏之處在所難免。衷心希望廣大專家﹑讀者給予諒解,批評指正。
內容概要
本書分為三篇,原理篇簡要介紹PCR基本原理、技術發(fā)展及重要應用;操作方法/技術篇按照由簡單到復雜的順序,依次詳細地介紹各種主流PCR技術在實際操作中的方法與技巧:常見問題解答篇采用一問一答的方式,根據(jù)編寫人員的實踐經驗,對PCR技術中常見的問題進行詳細解答。 內容涉及: 常規(guī)PCR 反轉錄PCR 實時熒光定量PCR 免疫PCR 利用PCR構建突變體 未知序列的克隆 其他常見PCR技術 PCR軟件的使用 與同類書相比,本書更加以實際經驗為基礎,突出實際操作技巧,采取Step-by-Step方式進行說明,使方法與技巧更易于掌握。 本書適用于醫(yī)藥、生命科學相關實驗室的技術人員及相關研究堂。
書籍目錄
原理篇 第1章 PCR技術基本原理 1.1 基本原理 1.2 PCR反應動力學 1.3 PCR技術的特點 1.4 PCR反應體系的組成 1.5 PCR所需設備和器材 參考文獻 第2章 PCR技術的發(fā)展 2.1 PCR新技術的發(fā)展 2.2 其他核酸擴增技術的發(fā)展 參考文獻 第3章 PCR技術在醫(yī)學研究領域中的應用 3.1 PCR在醫(yī)學檢驗中的應用 3.2 對PCR技術醫(yī)學應用的正確認識 3.3 PCR技術在醫(yī)學應用中的管理 參考文獻操作方法/技術篇 第4章 常規(guī)PCR 4.1 常規(guī)PCR反應體系說明 4.2 PCR操作 4.3 PCR條件優(yōu)化 參考文獻 第5章 反轉錄PCR 5.1 RT?PCR原理 5.2 RNA的提取和純化 5.3 RT?PCR的操作 5.4 衍生技術——基因表達系列分析 參考文獻 第6章 實時熒光定量PCR 6.1 原理 6.2 實驗操作與優(yōu)化 6.3 實時定量PCR數(shù)據(jù)分析93 6.4 qPCR的常用軟件——Primer Express99 6.5 qPCR儀的選擇 參考文獻 第7章 免疫PCR 7.1 原理 7.2 實驗操作 7.3 條件優(yōu)化 參考文獻 第8章 利用PCR構建突變體 8.1 定點突變 8.2 隨機誘變PCR 8.3 衍生技術 參考文獻 第9章 未知序列的克隆 9.1 RNA連接酶介導的cDNA 5′末端快速擴增 9.2 單側特異性引物擴增未知DNA序列 9.3 反向PCR 參考文獻 第10章 其他醫(yī)學領域常見PCR技術 10.1 PCR技術應用于病原微生物檢測鑒定 10.2 遺傳性疾病診斷的常用PCR技術 10.3 PCR技術在腫瘤方面的應用 10.4 甲基化特異性PCR 參考文獻 第11章 PCR軟件使用 11.1 Oligo 6的使用 11.2 PerlPrimer的使用 11.3 引物在線設計常見問題解答 附錄
編輯推薦
《PCR聚合酶鏈反應》較全面地描述了生物制品生產及檢定用細胞的種類﹑生長特性﹑培養(yǎng)方法﹑檢測內容﹑操作程序﹑判斷標準等內容。
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