出版時間:2009-5 出版社:浙江大學(xué)出版社 作者:錢國英 主編 頁數(shù):322
內(nèi)容概要
《生化實(shí)驗(yàn)技術(shù)與實(shí)施教程》是新的教學(xué)形勢催生的產(chǎn)物,不同于傳統(tǒng)的生化實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書,其主要特點(diǎn)是以鼓勵和培養(yǎng)學(xué)生自己動手、開發(fā)創(chuàng)新的精神為主導(dǎo),在編寫實(shí)驗(yàn)項目和內(nèi)容的同時,更體現(xiàn)教學(xué)方法的改革和創(chuàng)新。教材內(nèi)容由生化實(shí)驗(yàn)技術(shù)學(xué)習(xí)要求及教學(xué)組織實(shí)施、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)與原理、實(shí)驗(yàn)和附錄四部分組成,并全程體現(xiàn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)方法的實(shí)施和運(yùn)用。教程中所選實(shí)驗(yàn)項目融入了教師幾十年的實(shí)驗(yàn)教學(xué)經(jīng)驗(yàn),收集了部分現(xiàn)代生化實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教材的精華,內(nèi)容涵蓋糖、脂、蛋白質(zhì)、核酸和酶等領(lǐng)域,涉及層析技術(shù)、電泳技術(shù)、膜分離技術(shù)、分光光度法、大型精密儀器現(xiàn)代分析檢測法等常用的分離鑒定、定性定量分析手段,是高校非生物化學(xué)專業(yè)學(xué)生自主學(xué)習(xí)的良好生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教材,特別有利于教師組織和實(shí)施實(shí)驗(yàn)、學(xué)生預(yù)習(xí)和復(fù)習(xí)實(shí)驗(yàn),對生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)和生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)課程建設(shè)改革也有很大幫助。
書籍目錄
生化實(shí)驗(yàn)技術(shù)學(xué)習(xí)要求及教學(xué)組織實(shí)施第一部分 生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)與原理 第一章 離心分離技術(shù) 第二章 層析技術(shù) 第三章 電泳技術(shù) 第四章 膜分離技術(shù) 第五章 光學(xué)檢測技術(shù) 第六章 生物大分子制備技術(shù)第二部分 基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)項目 蛋白質(zhì) 實(shí)驗(yàn)一 氨基酸的分離鑒定——紙層析法 實(shí)驗(yàn)二 蛋白質(zhì)的性質(zhì)實(shí)驗(yàn)——蛋白質(zhì)及氨基酸的呈色反應(yīng) 實(shí)驗(yàn)三 蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)測定和沉淀反應(yīng) 實(shí)驗(yàn)四 血清蛋白質(zhì)醋酸纖維薄膜電泳 實(shí)驗(yàn)五 茚三酮顯色法測定氨基酸濃度 實(shí)驗(yàn)六 蛋白質(zhì)濃度測定方法 實(shí)驗(yàn)七 蛋白質(zhì)溶液脫鹽——透析脫鹽、凝膠層析法脫鹽 實(shí)驗(yàn)八 凝膠層析法測定蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量 實(shí)驗(yàn)九 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量 糖類 實(shí)驗(yàn)十 3,5-二硝基水楊酸比色法測定糖的濃度 實(shí)驗(yàn)十一 費(fèi)林試劑熱滴定定糖法 實(shí)驗(yàn)十二 可溶性總糖的測定(蒽酮比色法) 實(shí)驗(yàn)十三 糖的分離鑒定——硅膠G薄層層析法 酶 實(shí)驗(yàn)十四 酶的基本性質(zhì) 實(shí)驗(yàn)十五 植物組織中過氧化氫酶的活力測定——高錳酸鉀滴定法 實(shí)驗(yàn)十六 底物濃度對酶促反應(yīng)速度的影響——米氏常數(shù)的測定 脂類 實(shí)驗(yàn)十七 種子粗脂肪提取和定量測定——索氏提取法 實(shí)驗(yàn)十八 脂肪碘值的測定 核酸類 實(shí)驗(yàn)十九 核酸堿基的分離——紙層析法 實(shí)驗(yàn)二十 核酸的紫外掃描及濃度測定 實(shí)驗(yàn)二十一 定磷法測定RNA濃度 實(shí)驗(yàn)二十二 二苯胺顯色法測定DNA濃度 實(shí)驗(yàn)二十三 苔黑酚法測定RNA濃度 維生素 實(shí)驗(yàn)二十四 維生素C的定量測定——2,6-二氯酚靛酚法 實(shí)驗(yàn)二十五 維生素B,的定量測定——熒光法 實(shí)驗(yàn)二十六 核黃素的熒光法測定 代謝類 實(shí)驗(yàn)二十七 肌糖元酵解作用 實(shí)驗(yàn)二十八 脂肪酸J3-氧化作用 實(shí)驗(yàn)二十九 發(fā)酵過程中無機(jī)磷的利用和檢測 實(shí)驗(yàn)三十 氨基轉(zhuǎn)換反應(yīng)及其產(chǎn)物的鑒定第三部分 設(shè)計綜合開放實(shí)驗(yàn) 課前設(shè)疑 實(shí)驗(yàn)項目 實(shí)驗(yàn)三十一 動物脾臟DNA提取與分離鑒定 實(shí)驗(yàn)三十二 免疫球蛋白的分離純化 實(shí)驗(yàn)三十三 酯酶的分離、純化與活性測定 實(shí)驗(yàn)三十四 細(xì)胞色素c的制備和測定 實(shí)驗(yàn)三十五 蔗糖酶的分離純化及活力測定 實(shí)驗(yàn)三十六 親和層析純化胰蛋白酶第四部分 設(shè)計應(yīng)用實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)項目 實(shí)驗(yàn)三十七 血糖的定量測定 實(shí)驗(yàn)三十八 幾種水果中有機(jī)酸的定量測定與分析 實(shí)驗(yàn)三十九 維生素E濃度測定方法與比較 實(shí)驗(yàn)四十 多糖分離及鑒定(天然產(chǎn)物多糖提取分離、純化、鑒定實(shí)驗(yàn)設(shè)計) 實(shí)驗(yàn)四十一 高級脂肪酸的濃度的測定與分析(脂肪濃度測定及高級脂肪酸組分氣相色譜法分析實(shí)驗(yàn)設(shè)計) 實(shí)驗(yàn)四十二 食品中微量元素的濃度測定與分析(食品中銅濃度原子吸收法的測定實(shí)驗(yàn)設(shè)計) 實(shí)驗(yàn)四十三 正交法測定幾種因素對酶活力的影響附錄 一、實(shí)驗(yàn)基本操作及要求 二、常用蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)參照物 三、常用緩沖溶液的配制方法 四、實(shí)驗(yàn)室中常用酸堿的比重和濃度 五、常見蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量參考值 六、常見蛋白質(zhì)等電點(diǎn)參考值 參考文獻(xiàn)
章節(jié)摘錄
插圖:(4)有機(jī)溶劑處理法:利用氯仿、甲苯、丙酮等脂溶性溶劑或sDS(十二烷基硫酸鈉)等表 面活性劑處理細(xì)胞,可將細(xì)胞膜溶解,從而使細(xì)胞壁破裂,此法也可以與研磨法聯(lián)合使用。(三)生物大分子的提取“提取”是在分離純化之前將經(jīng)過預(yù)處理或破碎的細(xì)胞置于溶劑中,使被分離的生物大 分子充分地釋放到溶劑中,并盡可能保持原來的天然狀態(tài)、不丟失生物活性的過程。這一過 程是將目的產(chǎn)物與細(xì)胞中其他化合物和生物大分子分離,即由固相轉(zhuǎn)入液相,或從細(xì)胞內(nèi)的 生理狀況轉(zhuǎn)入外界特定的溶液中。影響提取的因素主要有:目的產(chǎn)物在提取的溶劑中溶解度的大??;由固相擴(kuò)散到液相的 難易;溶劑的pH值和提取時間等。一種物質(zhì)在某一溶劑中溶解度的大小與該物質(zhì)的分子 結(jié)構(gòu)及使用的溶劑的理化性質(zhì)有關(guān)。一般地說,極性物質(zhì)易溶于極性溶劑,非極性物質(zhì)易溶 于非極性溶劑;堿性物質(zhì)易溶于酸性溶劑,酸性物質(zhì)易溶于堿性溶劑;溫度升高,溶解度加 大,遠(yuǎn)離等電點(diǎn)的pH值,溶解度增加。提取時所選擇的條件應(yīng)有利于目的產(chǎn)物溶解度的增 加和保持其生物活性。
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