出版時(shí)間:2012-3 出版社:科學(xué)出版社 作者:Jeffrey A.Stuart 頁(yè)數(shù):403
內(nèi)容概要
自本書(shū)第1版出版以來(lái),被報(bào)道與生物能量代謝異常、細(xì)胞死亡及疾病相關(guān)的mtDNA突變?cè)诓粩嘣黾印M瑯?,我們?duì)mtDNA體細(xì)胞突變的生物學(xué)功能的了解也在繼續(xù)提高。在第2版中,來(lái)自8個(gè)國(guó)家的專(zhuān)家分享了他們?cè)趍tDNA研究領(lǐng)域各方面的專(zhuān)業(yè)知識(shí)和詳細(xì)的研究方法。斯圖亞特編著的《線(xiàn)粒體DNA(研究方法與實(shí)驗(yàn)方案原著第2版導(dǎo)讀版)》分為三部分,涵蓋了從mtDNA分子到氧化呼吸鏈復(fù)合物合成組裝這一通路的相關(guān)研究方法、線(xiàn)粒體活性氧簇(ROS)產(chǎn)生及mtDNA損傷和修復(fù)、mtDNA異質(zhì)性突變的鑒定和定量等內(nèi)容。本書(shū)秉承Springer《分子生物學(xué)方法》系列叢書(shū)的一貫風(fēng)格,闡述明晰、便于使用,每章包括對(duì)相關(guān)問(wèn)題的介紹,所需材料和試劑的清單,實(shí)驗(yàn)操作的具體步驟,以及常見(jiàn)問(wèn)題的解決方法和缺陷規(guī)避。
《線(xiàn)粒體DNA(研究方法與實(shí)驗(yàn)方案原著第2版導(dǎo)讀版)》為Springer經(jīng)典實(shí)驗(yàn)室指南系列《分子生物學(xué)方法》的分卷。
這本非常全面和權(quán)威的參考書(shū),將有望幫助研究者進(jìn)一步拓展我們關(guān)于細(xì)胞生物學(xué)這一重要領(lǐng)域的知識(shí)。
書(shū)籍目錄
前言
撰稿人
第一部分:線(xiàn)粒體DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯和呼吸鏈復(fù)合物組裝
1.動(dòng)物細(xì)胞mtDNA核狀小體的生化提取
2.二維瓊脂糖凝膠電泳分析線(xiàn)粒體DNA
3.果蠅和人線(xiàn)粒體DNA復(fù)制蛋白:DNA聚合酶7和線(xiàn)粒體單鏈DNA結(jié)合蛋白的比較純化策略
4.參與人類(lèi)疾病的線(xiàn)粒體DNA聚合酶突變體的功能分析
5.人類(lèi)線(xiàn)粒體單鏈DNA結(jié)合蛋白的純化制備
6.評(píng)估線(xiàn)粒體轉(zhuǎn)錄因子A(TFAM)與DNA結(jié)合的方法
7.線(xiàn)粒體DNA解旋酶在人類(lèi)細(xì)胞中的誘導(dǎo)表達(dá)、純化和體外功能分析
8.人類(lèi)線(xiàn)粒體DNA解旋酶重組蛋白的純化策略
9.用提取的蛋白組分研究線(xiàn)粒體轉(zhuǎn)錄終止的方法
10.氧化磷酸化:線(xiàn)粒體編碼蛋白的合成以及將單獨(dú)的結(jié)構(gòu)亞基組裝成具有功能的全酶復(fù)合物
第二部分:線(xiàn)粒體DNA的損傷和修復(fù)
11.線(xiàn)粒體活性氧簇的生成
12.超螺旋敏感的qPCR方法檢測(cè)mtDNA損傷
13.免疫熒光法定量分析線(xiàn)粒體DNA中氧化形式的鳥(niǎo)嘌呤(8—羥鳥(niǎo)嘌呤)
14.在分離的線(xiàn)粒體中體外檢測(cè)DNA堿基切除修復(fù)能力
15.利用穩(wěn)定轉(zhuǎn)染、瞬時(shí)轉(zhuǎn)染、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)及TAT介導(dǎo)的蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)方法靶向哺乳動(dòng)物細(xì)胞線(xiàn)粒體導(dǎo)入修復(fù)蛋白
16.一種局限線(xiàn)粒體DNA而非核DNA的氧化損傷修復(fù)缺陷的細(xì)胞系的構(gòu)建和功能分析
第三部分:線(xiàn)粒體DNA突變
17.釀酒酵母中線(xiàn)粒體DNA的氧化損傷和突變誘變
18.基于變性高效液相色譜(DHPLC)異源雙鏈分析法測(cè)定人類(lèi)組織中DNA突變異質(zhì)性
19.利用特異識(shí)別異源雙鏈錯(cuò)配位點(diǎn)的Surveyor核酸酶快速檢測(cè)未知的異質(zhì)性線(xiàn)粒體DNA突變
20.用于單細(xì)胞線(xiàn)粒體DNA突變分析的細(xì)胞分離和收集方法
21.采用單細(xì)胞單分子PcR定量分析線(xiàn)粒體DNA體細(xì)胞突變
22.線(xiàn)粒體中DNA前體庫(kù)(dNTP庫(kù))的測(cè)定
23.構(gòu)建缺乏線(xiàn)粒體DNA的人類(lèi)細(xì)胞系
索引
圖書(shū)封面
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