核酸探針與原位雜交技術(shù)

出版時(shí)間:2001-12  出版社:上海第二軍醫(yī)大學(xué)出版社  作者:向正華 劉厚奇  頁數(shù):192  字?jǐn)?shù):162000  

內(nèi)容概要

目前許多學(xué)科均采用核酸探針與原位雜交技術(shù),使其研究跨上一個(gè)新臺(tái)階達(dá)到了分子水平。本書共分九章。內(nèi)容包括:相關(guān)的基礎(chǔ)知識(shí);核酸雜交技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用范圍;各種核酸探針的制備過程;原位雜交技術(shù)條件選擇、標(biāo)本制備和不同實(shí)驗(yàn)操作方法及其注意事項(xiàng);計(jì)算機(jī)處理雜交信號(hào)的基本原理及操作時(shí)的注意事項(xiàng);附錄中介紹了相關(guān)試劑的配制。本書短小精悍,注重實(shí)際操作,可供廣大從事生物醫(yī)學(xué)研究工作者使用。

書籍目錄

第一章  核酸探針與原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)知識(shí)  第一節(jié)  核酸的分子結(jié)構(gòu)  第二節(jié)  核酸的變性與復(fù)性  第三節(jié)  工具酶  第四節(jié)  載體  第五節(jié)  DNA重組技術(shù)第二章  核酸分子雜交技術(shù)的建立與進(jìn)展  第一節(jié)  核酸分子雜交技術(shù)建立與發(fā)展  第二節(jié)  原位雜交技術(shù)建立與發(fā)展  第三節(jié)  原位雜交組織化學(xué)技術(shù)的應(yīng)用第三章  核酸探針模板的制備  第一節(jié)  感受態(tài)細(xì)菌的制備和質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化  第二節(jié)  重組質(zhì)粒的大量擴(kuò)增  第三節(jié)  重組質(zhì)粒的小量擴(kuò)增、抽提和純化  第四節(jié)  通過核酸限制性內(nèi)切酶制備目的cDNA片段  第五節(jié)  轉(zhuǎn)錄cDNA用的線性DNA模板的制備  第六節(jié)  寡聚核苷酸的制備  第七節(jié)  用RT-PCR方法制備核酸探針模板  第八節(jié)  應(yīng)用PCR方法制備核酸探針模板第四章  核酸探針的放射性標(biāo)記和純化方法  第一節(jié)  放射性物質(zhì)一般特性  第二節(jié)  通過酶學(xué)修飾標(biāo)記DNA第五章  核酸探針的非放射性標(biāo)記方法  第一節(jié)  通過缺口平移法用修飾的苷酸標(biāo)記DNA的方法  第二節(jié)  能地隨機(jī)引物法用修飾苷酸標(biāo)記的DNA  第三節(jié)  接尾法標(biāo)記DNA片段  第四節(jié)  生物素化的RNA探針的制備  第五節(jié)  地高辛反義cRNA探針的制備  第六節(jié)  寡核苷酸的標(biāo)記  第七節(jié)  核苷酸的原位標(biāo)記法第六章  原位核酸分子雜交實(shí)驗(yàn)條件的選擇  第一節(jié)  探針選擇和特異性  第二節(jié)  核酸分子雜交的速率  第三節(jié)  核酸探針濃度  第四節(jié)  雜交及洗滌條件的嚴(yán)格性  第五節(jié)  雜交反應(yīng)的促進(jìn)劑  第六節(jié)  探針長(zhǎng)度 ……第七章  原位雜交組織化學(xué)所用組織細(xì)胞標(biāo)本的制備第八章  原位雜交組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)步驟第九章  應(yīng)用計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)對(duì)原位雜交信號(hào)的定量分析附錄:核酸探針與原位雜交技術(shù)所需儀器與試劑

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