細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教程

內(nèi)容概要

本書是王金發(fā)教授主持編寫的《細(xì)胞生物學(xué)》配套實(shí)驗(yàn)教材，是在2004年出版的《細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教程》基礎(chǔ)上重新修訂的。全書包括12章共71個(gè)實(shí)驗(yàn)，內(nèi)容既保留了目前在細(xì)胞生物學(xué)研究領(lǐng)域中經(jīng)常用到的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)，又新增了不少與現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)相關(guān)的新技術(shù)，包括：線粒體膜電位檢測，抗性膜和膽固醇去除，細(xì)胞電泳技術(shù)，DNA、RNA和蛋白質(zhì)的原位雜交，差異基因表達(dá)，酵母中cDNA的表達(dá)，細(xì)胞凋亡檢測，果蠅胚胎的共聚焦顯微技術(shù)等。
本書可供綜合性大學(xué)及農(nóng)林、醫(yī)學(xué)、師范院校本科生和研究生細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課教學(xué)使用，也可作為從事相關(guān)專業(yè)研究人員的參考用書。

書籍目錄

第二版前言
第一版前言
第一章光學(xué)顯微鏡技術(shù)
實(shí)驗(yàn)1普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造原理及使用方法
實(shí)驗(yàn)2特殊顯微鏡的原理和使用
實(shí)驗(yàn)3光學(xué)顯微標(biāo)本的制作技術(shù)
第二章電子顯微鏡技術(shù)
實(shí)驗(yàn)4透射電子顯微鏡
實(shí)驗(yàn)5透射電子顯微鏡樣品制備
實(shí)驗(yàn)6掃描電子顯微鏡
實(shí)驗(yàn)7掃描電子顯微鏡樣品制備
第三章細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)
實(shí)驗(yàn)8細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)與幾種細(xì)胞器的觀察
實(shí)驗(yàn)9液泡系和線粒體的活體染色
實(shí)驗(yàn)10用熒光脂質(zhì)進(jìn)行細(xì)胞活體染色
實(shí)驗(yàn)11植物細(xì)胞骨架的光學(xué)顯微鏡觀察
實(shí)驗(yàn)12細(xì)胞骨架的免疫熒光顯示
實(shí)驗(yàn)13細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)
實(shí)驗(yàn)14細(xì)胞的顯微測量
第四章細(xì)胞化學(xué)
實(shí)驗(yàn)15DNA的細(xì)胞化學(xué)——Feulgen反應(yīng)
實(shí)驗(yàn)16RNA的細(xì)胞化學(xué)——Brachet反應(yīng)
實(shí)驗(yàn)17細(xì)胞中多糖和過氧化物酶的定位
實(shí)驗(yàn)18細(xì)胞中酸性磷酸酶的定位
實(shí)驗(yàn)19細(xì)胞中堿性磷酸酶的定位
第五章細(xì)胞生理
實(shí)驗(yàn)20小鼠巨噬細(xì)胞吞噬的觀察
實(shí)驗(yàn)21胞飲作用
實(shí)驗(yàn)22細(xì)胞膜的通透性
實(shí)驗(yàn)23核質(zhì)穿梭測定法
實(shí)驗(yàn)24線粒體膜電位檢測
實(shí)驗(yàn)25細(xì)胞電泳
第六章細(xì)胞分裂與染色體畸變
實(shí)驗(yàn)26細(xì)胞的無絲分裂與有絲分裂
實(shí)驗(yàn)27細(xì)胞減數(shù)分裂
實(shí)驗(yàn)28環(huán)境因素及輻射誘變?nèi)旧w改組的觀察
實(shí)驗(yàn)29細(xì)胞毒和細(xì)胞生長測定
實(shí)驗(yàn)30彗星測定
第七章染色體技術(shù)與核型分析
實(shí)驗(yàn)31植物染色體標(biāo)本的制備和觀察
實(shí)驗(yàn)32動(dòng)物骨髓細(xì)胞染色體標(biāo)本的制備
實(shí)驗(yàn)33人體外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)與染色體標(biāo)本制備
實(shí)驗(yàn)34人類染色體G帶技術(shù)
實(shí)驗(yàn)35植物染色體分帶技術(shù)
實(shí)驗(yàn)36人類體細(xì)胞染色體組型分析
實(shí)驗(yàn)37染色體核仁組織區(qū)(NOR)的顯示
實(shí)驗(yàn)38姐妹染色單體色差分析技術(shù)
第八章細(xì)胞和組織培養(yǎng)技術(shù)
實(shí)驗(yàn)39植物組織培養(yǎng)技術(shù)
實(shí)驗(yàn)40原生質(zhì)體的分離和培養(yǎng)
實(shí)驗(yàn)41細(xì)胞計(jì)數(shù)
實(shí)驗(yàn)42動(dòng)物細(xì)胞原代培養(yǎng)
實(shí)驗(yàn)43果蠅胚胎細(xì)胞的原代培養(yǎng)
實(shí)驗(yàn)44傳代細(xì)胞培養(yǎng)
實(shí)驗(yàn)45細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇
第九章細(xì)胞化學(xué)成分的分離
實(shí)驗(yàn)46細(xì)胞核與線粒體的分級(jí)分離
實(shí)驗(yàn)47高爾基體的分離
實(shí)驗(yàn)48核仁的分離
實(shí)驗(yàn)49過氧化物體的分離
實(shí)驗(yàn)50完整葉綠體的分離
實(shí)驗(yàn)51中期染色體的分離純化
實(shí)驗(yàn)52動(dòng)物細(xì)胞基因組DNA的提取
實(shí)驗(yàn)53植物基因組DNA的提取
實(shí)驗(yàn)54細(xì)胞和組織總RNA的提取
第十章蛋白質(zhì)、核酸的定位與檢測
實(shí)驗(yàn)55瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA片段
實(shí)驗(yàn)56同步檢測DNA、RNA和蛋白質(zhì)的原位雜交技術(shù)
實(shí)驗(yàn)57銀染法檢測凝膠中的蛋白質(zhì)——改良硝酸銀染法
實(shí)驗(yàn)58染色質(zhì)免疫共沉淀
實(shí)驗(yàn)59代表性差異分析：研究差異基因表達(dá)的方法
實(shí)驗(yàn)60酵母中cDNA表達(dá)
第十一章細(xì)胞工程技術(shù)
實(shí)驗(yàn)61細(xì)胞融合
實(shí)驗(yàn)62植物體細(xì)胞雜交——原生質(zhì)體的融合
實(shí)驗(yàn)63單克隆抗體的制備
實(shí)驗(yàn)64產(chǎn)細(xì)胞克隆測定
實(shí)驗(yàn)65去污劑抗性膜和膽固醇去除的應(yīng)用
第十二章其他技術(shù)
實(shí)驗(yàn)66細(xì)胞放射自顯影
實(shí)驗(yàn)67流式細(xì)胞技術(shù)
實(shí)驗(yàn)68熒光標(biāo)記技術(shù)
實(shí)驗(yàn)69細(xì)胞凋亡的檢測
實(shí)驗(yàn)70共聚焦顯微技術(shù)及去旋技術(shù)
實(shí)驗(yàn)71果蠅胚胎的共聚焦顯微技術(shù)
參考文獻(xiàn)
附錄
附錄1一些常用的換算
附錄2常用試劑及溶液的配制和使用
附錄3光學(xué)儀器保養(yǎng)與清潔的要點(diǎn)
附錄4常用縮寫匯編
附錄5常用細(xì)菌培養(yǎng)基的配方

章節(jié)摘錄

版權(quán)頁：插圖：第一章 光學(xué)顯微鏡技術(shù)顯微鏡是在人們認(rèn)識(shí)到凸透鏡放大作用的基礎(chǔ)上發(fā)明的。據(jù)歷史記載，12世紀(jì)阿拉伯人阿爾海琴（Anlagen）已會(huì)磨制透鏡。1604年荷蘭眼鏡商詹森（Janssen）創(chuàng)造了第一臺(tái)放大率不超過10倍的復(fù)式顯微鏡。半個(gè)多世紀(jì)后，英國物理學(xué)家胡克創(chuàng)制了第一架具有科學(xué)研究價(jià)值的顯微鏡，首次觀察了木栓的顯微圖像，他發(fā)現(xiàn)并命名了細(xì)胞（cell）。真正觀察到活細(xì)胞的是荷蘭科學(xué)家列文虎克，他用自制的顯微鏡觀察到了池塘水中的原生動(dòng)物，還有人和哺乳類動(dòng)物的精子、細(xì)菌等?？梢哉f沒有顯微鏡的發(fā)明就沒有細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，顯微鏡的種類越來越多，性能更加完善，使用范圍也越來越廣泛，不僅可以用來觀察細(xì)胞形態(tài)和內(nèi)部結(jié)構(gòu)，而且還可以通過與其他技術(shù)的結(jié)合，進(jìn)行細(xì)胞化學(xué)成分的定位、定性、定量，以及物質(zhì)代謝、細(xì)胞生理、免疫和遺傳等功能方面的研究，是細(xì)胞生物學(xué)研究中用途最廣的儀器之一，沒有它也就無法打開生物界的微觀大門。因此了解各種普通光學(xué)顯微鏡及其結(jié)構(gòu)原理和操作方法具有重要的作用和意義。本章將介紹常用的普通光學(xué)顯微鏡和特殊顯微鏡的結(jié)構(gòu)、原理、應(yīng)用以及顯微攝影技術(shù)。實(shí)驗(yàn)1普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造原理及使用方法【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚?）熟悉普通光學(xué)顯微鏡的主要結(jié)構(gòu)和基本性能。（2）掌握低倍鏡、高倍鏡和油鏡的正確使用方法。（3）初步了解光學(xué)顯微鏡的維護(hù)方法。【實(shí)驗(yàn)原理】普通光學(xué)顯微鏡（microscope）是最常用的一種光學(xué)顯微鏡。它利用光線照明，標(biāo)本中各點(diǎn)依其光吸收（光的振幅發(fā)生變化）的不同而在明亮的背景中成像。它由物鏡、目鏡、聚光器、光源、載物臺(tái)和支架等部件組成。其中，聚光鏡用于調(diào)節(jié)顯微鏡的照明，物鏡和目鏡是放大微小物體成像的主要部件。其基本成像原理是：目鏡、物鏡、聚光器各自相當(dāng)于一個(gè)凸透鏡，被檢標(biāo)本置于聚光器與物鏡之間，物鏡可使標(biāo)本在物鏡的上方形成一個(gè)倒立的放大實(shí)像（倒像）。目鏡將此倒像進(jìn)一步放大成像于人眼的視網(wǎng)膜上，形成一個(gè)正立的實(shí)像（正像）。顯微鏡中放大的倒立的虛像與視網(wǎng)膜上正立的實(shí)像是相吻合的，該虛像看起來好像在離眼睛250mm處（圖1-1）。

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