微生物學(xué)實驗教程

前言

　　《微生物學(xué)實驗教程》是在吸取各兄弟院校實驗教材編寫和教學(xué)經(jīng)驗基礎(chǔ)上，結(jié)合近年來微生物學(xué)實驗技術(shù)的發(fā)展前沿，由7所高校從事教學(xué)多年的教師撰寫而成。針對當(dāng)前實驗教學(xué)需求，反映教學(xué)改革發(fā)展的方向，本書旨在加強學(xué)生動手能力、自主分析問題和解決問題的能力，在實驗內(nèi)容的更新、實驗體系的系統(tǒng)性及與理論課教學(xué)的同步性等方面進行了精心編排。本書從培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)造性、自主性出發(fā)，以學(xué)生為主體，以提高學(xué)生發(fā)現(xiàn)問題、分析問題和解決問題的能力為指導(dǎo)思想，將實驗框架分為基礎(chǔ)性實驗、綜合性實驗和研究性實驗3個部分，形成基礎(chǔ)-綜合-創(chuàng)新的梯級實驗體系，內(nèi)容涉及微生物的形態(tài)和結(jié)構(gòu)、營養(yǎng)和培養(yǎng)基、代謝和發(fā)酵、生長和控制、遺傳變異和基因表達、傳染和免疫、生態(tài)和分類以及鑒定和應(yīng)用等，共43個實驗項目，各相關(guān)專業(yè)師生可根據(jù)自身教學(xué)任務(wù)和條件酌情選做。　　本書的編著者均為多年教授微生物實驗課程的優(yōu)秀教師，編寫具體分工是實驗1、2、3由德州學(xué)院馮建英執(zhí)筆，實驗4、6、8、9、36、37、38由青島農(nóng)業(yè)大學(xué)李樹文執(zhí)筆，實驗5、11、16、17、18、31、32由泰山醫(yī)學(xué)院張麗青、徐英萍執(zhí)筆，實驗7、23、29、35由河北農(nóng)業(yè)大學(xué)袁洪水執(zhí)筆，實驗10、15、20、22由青島農(nóng)業(yè)大學(xué)洪永聰執(zhí)筆，實驗12、24、26、33由臨沂師范學(xué)院吳韶菊執(zhí)筆，實驗13、39由青島農(nóng)業(yè)大學(xué)郭立忠執(zhí)筆，實驗14、25、27、28、30由濰坊教育學(xué)院燕淑海執(zhí)筆，實驗19、40、41由青島農(nóng)業(yè)大學(xué)咸洪泉執(zhí)筆，實驗21、34、42、43由聊城大學(xué)趙培寶執(zhí)筆。青島農(nóng)業(yè)大學(xué)李樹文對全書的文字進行校訂和修改。本書在編寫過程中得到青島農(nóng)業(yè)大學(xué)和各兄弟院校領(lǐng)導(dǎo)和教師的大力支持和幫助，在此一并表示感謝。

內(nèi)容概要

本書編寫的中心思想是以基礎(chǔ)實驗為前提，進一步提高學(xué)生的綜合素質(zhì)，從而發(fā)揮學(xué)生的創(chuàng)造性、自主性。全書內(nèi)容全面、系統(tǒng)，圖文并茂，兼顧理論性、科學(xué)性、系統(tǒng)性和實用性，其內(nèi)容涉及微生物在工業(yè)、農(nóng)業(yè)、環(huán)保、醫(yī)療和食品等領(lǐng)域的應(yīng)用。全書共分為三部分：第一部分，基礎(chǔ)性實驗的內(nèi)容包括：微生物的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、營養(yǎng)、生長、選育保藏、生理生化以及免疫學(xué)試驗等，主要使學(xué)生掌握基本的實驗理論知識和操作技能；第二部分，綜合性實驗的內(nèi)容包括：遺傳物質(zhì)的提取鑒定、水質(zhì)檢測、發(fā)酵的工藝流程以及免疫分析試驗等，主要培養(yǎng)學(xué)生綜合運用知識的能力；第三部分，研究性實驗的內(nèi)容包括：菌株選育和鑒定、基因表達以及發(fā)酵條件的優(yōu)化等，著重培養(yǎng)學(xué)生在掌握基本理論和操作技能的基礎(chǔ)上的創(chuàng)新能力。書后附有附錄和參考文獻，供讀者查閱和參考?！　”緯m合高等院校生物科學(xué)與工程類、農(nóng)學(xué)類、環(huán)境科學(xué)與工程類、食品科學(xué)與工程類以及藥學(xué)類各專業(yè)學(xué)生學(xué)習(xí)使用，也可供相關(guān)專業(yè)人員查閱和參考。

書籍目錄

第一篇 基礎(chǔ)性　實驗　實驗1 培養(yǎng)基的配制與滅菌　實驗2 微生物的分離、純化與微生物的培養(yǎng)特征　實驗3 細菌的染色方法　實驗4 放線菌、酵母菌、霉菌形態(tài)觀察　實驗5 微生物細胞大小的測定和顯微鏡直接計數(shù)　實驗6 稀釋培養(yǎng)測數(shù)法(MPN)　實驗7 細菌生長曲線的測定　實驗8 細菌的生理生化試驗(IMViC與硫化氫試驗)　實驗9 糖發(fā)酵與淀粉水解試驗　實驗10 物理、化學(xué)因素對微生物的影響　實驗11 生長譜法測定微生物的營養(yǎng)需求　實驗12 微生物的物理、化學(xué)誘變　實驗13 微生物菌種保藏方法　實驗14 厭氧菌的分離和培養(yǎng)　實驗15 噬菌體的檢查及其效價測定　實驗16 免疫血清的制備　實驗17 凝集反應(yīng)　實驗18 瓊脂雙向擴散沉淀反應(yīng)　實驗19 機械攪拌通風(fēng)發(fā)酵罐的結(jié)構(gòu)和基本操作技術(shù)第二篇 綜合性　實驗　實驗20 大腸桿菌質(zhì)粒DNA的提取和電泳檢測　實驗21 酵母RNA的提取及組分鑒定　實驗22 大腸桿菌感受態(tài)細胞的制備和轉(zhuǎn)化　實驗23 抗藥性突變株的分離　實驗24 水中大腸菌群的測定　實驗25 水中生化需氧量(BOD)的測定　實驗26 酸乳的制作和乳酸生產(chǎn)菌的分離　實驗27 甜酒釀的制作　實驗28 葡萄酒的制作　實驗29 快速、簡易的微生物檢測技術(shù)　實驗30 酵母細胞的固定化與乙醇發(fā)酵　實驗31 對流免疫電泳試驗　實驗32 酶聯(lián)免疫吸附分析法(ELISA)第三篇 研究性　實驗　實驗33 從土壤中分離、純化、篩選產(chǎn)酶菌株　實驗34 酵母菌原生質(zhì)體融合　實驗35 產(chǎn)氨基酸抗反饋調(diào)節(jié)突變株的篩選　實驗36 糖化酶的固體發(fā)酵和提取　實驗37 發(fā)酵培養(yǎng)基的正交試驗設(shè)計　實驗38 發(fā)酵條件的響應(yīng)面優(yōu)化　實驗39 藥用真菌多糖的提取　實驗40 細菌16srRNA基因的擴增與克隆　實驗41 真菌的分子生物學(xué)鑒定　實驗42 外源基因的原核表達　實驗43 外源基因的真核表達附錄?、?染色液的配制?、?常用培養(yǎng)基的配制?、?常用試劑和溶液的配制?、?微生物基因克隆表達常用試劑與培養(yǎng)基的配制?、?酵母原生質(zhì)體融合　實驗用培養(yǎng)基及溶液的配制參考文獻

章節(jié)摘錄

　　細胞固定化技術(shù)是利用物理或化學(xué)方法將細胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，但細胞仍保留催化活性并能反復(fù)或連續(xù)使用。常用的方法包括包埋法、吸附法和不用載體法?！　“穹ǎ喊穹ㄊ菍⑽⑸锛毎鶆虻匕裨诙嗫椎乃蝗苄暂d體的緊密結(jié)構(gòu)中，細胞中的酶處于活化狀態(tài)，因而活性高、活力耐久。常用的載體有明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素和聚丙烯酰胺等?！　∥椒ǎ何椒ǚ治锢砦椒ê碗x子交換吸附法。物理吸附法是將微生物細胞附著于固體載體上的一種固定方法，載體常用多孔磚、瓷杯、木屑、蔗渣、聚氯乙烯、硅藻土、玻璃纖維等。如將酵母用聚氯乙烯或多孔磚固定化，每克載體可以固定80mg酵母。物理吸附法載體與微生物細胞間不起反應(yīng)，吸附量大，但細胞極容易脫落而流失。離子交換吸附法利用離子交換吸附細胞，常用的載體是離子交換樹脂，例如利用陰離子交換樹脂吸附放線菌含葡萄糖異構(gòu)酶含酶菌株。這種方法制備的固定化細胞，細胞易脫落，需不斷補充新細胞。　　不用載體法：不用載體法是選擇適當(dāng)?shù)臈l件，通過一定處理使酶固定在細胞內(nèi)的一種方法。如葡萄糖異構(gòu)酶是一種胞內(nèi)酶，將生物細胞加熱至60℃，10min，其他酶失活，則該酶被固定在細胞內(nèi)，所以又稱加熱固定化。

圖書封面

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