免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)

內(nèi)容概要

本書(shū)的編寫(xiě)指導(dǎo)思想是打破傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)教學(xué)模式，不受學(xué)生專業(yè)與層次的限制，以能力培養(yǎng)為主線，推進(jìn)學(xué)生自主學(xué)習(xí)、研究性學(xué)習(xí)。對(duì)實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容進(jìn)行分類、整合，形成了基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)、經(jīng)典驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)、綜合性實(shí)驗(yàn)、臨床免疫實(shí)驗(yàn)、創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)五篇，共27章，85個(gè)實(shí)驗(yàn)。完全能夠滿足各層次、各專業(yè)免疫學(xué)教學(xué)的需求。在基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)中介紹了現(xiàn)代免疫學(xué)常用方法技術(shù)，例如細(xì)胞培養(yǎng)、基因克隆、動(dòng)物模型的建立等，為創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)提供了鋪墊。在創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)中，提出了有一定覆蓋面和代表性的設(shè)計(jì)選題范例或方向，寫(xiě)作手法以啟迪思維為主，但不失指導(dǎo)性與示范性，體現(xiàn)了我們注重學(xué)生能力培養(yǎng)所做的探索。臨床免疫實(shí)驗(yàn)中介紹了目前臨床常用的免疫學(xué)檢驗(yàn)方法在疾病診斷、防治中的應(yīng)用，例如微粒子酶免疫分析技術(shù)、電化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定、熒光偏振免疫測(cè)定法等。    本教材由教學(xué)經(jīng)驗(yàn)和實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn)豐富的教師編寫(xiě)，力求原理講解清楚，方法介紹明白，不少內(nèi)容是作者的經(jīng)驗(yàn)之談。全書(shū)約32萬(wàn)字，插圖57幅。適用于五年制、七年制各專業(yè)基礎(chǔ)免疫學(xué)和臨床免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)，也可供相關(guān)專業(yè)的教師、研究生以及從事臨床檢驗(yàn)、衛(wèi)生防疫、免疫學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員使用。

作者簡(jiǎn)介

吳玉章，1963年1月生，中共黨員，教授，博士生導(dǎo)師?，F(xiàn)任第三軍醫(yī)大學(xué)免疫學(xué)教研室主任，全軍分子免疫學(xué)重點(diǎn)（開(kāi)放）實(shí)驗(yàn)室主任，全軍免疫學(xué)研究所所長(zhǎng)，重慶市多肽藥物工程技術(shù)研究中心主任，重慶市生物信息學(xué)研究所所長(zhǎng)。兼任中國(guó)免疫學(xué)會(huì)常務(wù)理事，中國(guó)基礎(chǔ)免疫學(xué)會(huì)主任委員，國(guó)家自然科學(xué)基金學(xué)科評(píng)議組成員，國(guó)家新藥審評(píng)委員會(huì)專家，全軍免疫學(xué)專業(yè)委員會(huì)副主任委員；是國(guó)家教育部長(zhǎng)江學(xué)者特聘教授，國(guó)家杰出青年基金獲得者，國(guó)務(wù)院政府特殊津貼獲得者，全國(guó)醫(yī)學(xué)中青年百名科技之星，總后勤部院士后備人選，總后勤部科技銀星，重慶市自然科學(xué)一等獎(jiǎng)獲得者。“JIm鄄munolMethods”特約審稿人等10個(gè)學(xué)術(shù)職務(wù)。我國(guó)、我軍免疫學(xué)領(lǐng)域的知名青年專家，免疫識(shí)別研究領(lǐng)域的開(kāi)拓者之一。吳玉章教授長(zhǎng)期從事免疫識(shí)別、分子設(shè)計(jì)與抗原工程，率先將分子設(shè)計(jì)的理論和技術(shù)應(yīng)用于免疫學(xué)，以“免疫識(shí)別、分子設(shè)計(jì)與抗原工程”為研究方向，開(kāi)拓了免疫學(xué)研究的新領(lǐng)域。組建了多肽合成、蛋白質(zhì)組學(xué)、免疫信息學(xué)、蛋白質(zhì)純化鑒定等18個(gè)專業(yè)實(shí)驗(yàn)室，建立了免疫識(shí)別和反向疫苗學(xué)的技術(shù)體系。在國(guó)內(nèi)率先開(kāi)展了蛋白質(zhì)抗原和超抗原的高分辨率免疫識(shí)別研究，建立了國(guó)際上第一個(gè)病毒表位數(shù)據(jù)庫(kù)，創(chuàng)立了系列表位預(yù)測(cè)和實(shí)驗(yàn)探測(cè)方法，發(fā)現(xiàn)和鑒定了12種新的人腫瘤相關(guān)抗原和55個(gè)新的優(yōu)勢(shì)表位，提出了蛋白質(zhì)抗原免疫識(shí)別的氨基酸密碼學(xué)說(shuō)；首次鑒定出HBV特異性非溶破性表位，提出了CTL表位按功能分類的觀點(diǎn)；提出了“通過(guò)模擬抗原（英文譯名為mimogen）克服機(jī)體對(duì)天然抗原的免疫耐受從而進(jìn)行免疫治療的治療性疫苗研制全新策略”，創(chuàng)立了“根據(jù)表位設(shè)計(jì)疫苗（英文譯名為epitope-basedvaccinedesign，EBVD）的全新技術(shù)路線”。采用上述理論和技術(shù),研制了具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的國(guó)家I類新生物制品——-治療用（合成肽）乙型肝炎疫苗，已批準(zhǔn)進(jìn)入II期臨床試驗(yàn)。先后主持“基于表位識(shí)別的結(jié)構(gòu)信息研究”、“SARS病毒抗原免疫識(shí)別與免疫應(yīng)答機(jī)理研究”、“抗原結(jié)構(gòu)與免疫應(yīng)答的關(guān)系”、“治療用（合成肽）乙型肝炎疫苗的研制”、“乙肝治療性多肽的研究”等國(guó)家自然科學(xué)基金重大項(xiàng)目、重大計(jì)劃、國(guó)家“973”計(jì)劃、國(guó)家科技重大專項(xiàng)、“863“計(jì)劃共30余項(xiàng)課題。其中“超抗原TSST-1細(xì)胞免疫識(shí)別研究”項(xiàng)目獲軍隊(duì)科技進(jìn)步二等獎(jiǎng)，“蛋白質(zhì)特性與免疫應(yīng)答的關(guān)系”項(xiàng)目獲重慶市自然科學(xué)一等獎(jiǎng)。先后招收、培養(yǎng)碩士35名，博士、博士后42名。以第一作者或通訊作者在JVirol、AntiviralTherapy、ClinChem、ClinCancerRes、EurJImmunol等國(guó)內(nèi)外著名學(xué)術(shù)刊物共發(fā)表科研論文230篇，其中國(guó)外SCI雜志56篇，主編專著4部，參編2部，主要代表專著有：免疫學(xué)進(jìn)展（四川科學(xué)技術(shù)出版社，1995年）；基礎(chǔ)免疫學(xué)，科學(xué)出版社，（2003年）。朱道銀，男，籍貫四川仁壽。1968年畢業(yè)于原重慶醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)系，1981年該院免疫學(xué)專業(yè)碩士研究生畢業(yè)，畢業(yè)后留學(xué)校工作至今。1991年任副教授，1996年任教授，1998年評(píng)為博士生導(dǎo)師。1991－2005年任微生物學(xué)與免疫學(xué)教研室主任?，F(xiàn)任重慶市微生物學(xué)會(huì)副主任委員、重慶醫(yī)科大學(xué)免疫學(xué)研究室主任、重慶市首屆學(xué)術(shù)技術(shù)帶頭人、《國(guó)際醫(yī)學(xué)生物制品雜志》副主編。先后主持多項(xiàng)國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目及省、市科研課題的研究。長(zhǎng)期從事感染與免疫研究方向的研究，對(duì)淋球菌、沙眼衣原體的研究頗具特色，對(duì)結(jié)核分枝桿菌感染與免疫的研究居國(guó)內(nèi)先進(jìn)水平。先后在國(guó)內(nèi)外期刊發(fā)表科研論文60余篇，綜述30余篇，參編科學(xué)專著4部。結(jié)核病治療性疫苗的研究成果獲2005年重慶市科技進(jìn)步二等獎(jiǎng)。長(zhǎng)期從事各層次學(xué)生的教學(xué)工作。作為主編、副主編、編委參加《醫(yī)學(xué)免疫學(xué)》、《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》等12部教材的編寫(xiě)，其中衛(wèi)生部規(guī)劃教材4部，高等教育醫(yī)學(xué)規(guī)劃教材1部。曾獲1996年中華國(guó)際醫(yī)學(xué)交流基金會(huì)林宗揚(yáng)醫(yī)學(xué)教育獎(jiǎng)、1998年香港柏寧頓教育基金會(huì)孺子牛金球獎(jiǎng)。先后招收培養(yǎng)研究生30余名，其中博士生12名，多次被學(xué)校評(píng)為優(yōu)秀研究生導(dǎo)師。

書(shū)籍目錄

第一篇  基本實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)　第1章  血液標(biāo)本的采集　　實(shí)驗(yàn)一  人血液標(biāo)本的采集　　實(shí)驗(yàn)二  動(dòng)物血液標(biāo)本的采集及動(dòng)物處死方法　第2章  細(xì)胞計(jì)數(shù)及活性測(cè)定　　實(shí)驗(yàn)三  細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法　　實(shí)驗(yàn)四  細(xì)胞活力測(cè)定　第3章  細(xì)胞培養(yǎng)　　實(shí)驗(yàn)五  細(xì)胞培養(yǎng)用器材的準(zhǔn)備與無(wú)菌操作　　實(shí)驗(yàn)六  原代細(xì)胞培養(yǎng)　　實(shí)驗(yàn)七  細(xì)胞傳代培養(yǎng)　　實(shí)驗(yàn)八  細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇　第4章  動(dòng)物模型的建立　　實(shí)驗(yàn)九  免疫功能低下動(dòng)物模型　　實(shí)驗(yàn)十  移植性腫瘤動(dòng)物模型　第5章　　實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥方法　　實(shí)驗(yàn)十一　實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捉持與固定　　實(shí)驗(yàn)十二　實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥方法　第6章  目的基因的克隆與表達(dá)　　實(shí)驗(yàn)十三  RT-PCR擴(kuò)增小鼠IL-2基因　　實(shí)驗(yàn)十四  小鼠IL-2原核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建　　實(shí)驗(yàn)十五  重組mIL-2的誘導(dǎo)表達(dá)及SDS-PAGE鑒定　　實(shí)驗(yàn)十六  重組mIL-2的親合層析純化及濃度測(cè)定第二篇  經(jīng)典驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)　第7章  凝集反應(yīng)　　實(shí)驗(yàn)十七  玻片凝集試驗(yàn)　　實(shí)驗(yàn)十八  試管凝集試驗(yàn)　　實(shí)驗(yàn)十九  間接凝集試驗(yàn)　　實(shí)驗(yàn)二十  協(xié)同凝集試驗(yàn)　第8章  沉淀反應(yīng)　　實(shí)驗(yàn)二十一  單向瓊脂擴(kuò)散　　實(shí)驗(yàn)二十二  雙向瓊脂擴(kuò)散　　實(shí)驗(yàn)二十三  對(duì)流免疫電泳　　實(shí)驗(yàn)二十四  免疫電泳　　實(shí)驗(yàn)二十五  火箭免疫電泳　　實(shí)驗(yàn)二十六  交叉免疫電泳　　實(shí)驗(yàn)二十七  免疫比濁　第9章  補(bǔ)體參與的免疫反應(yīng)　　實(shí)驗(yàn)二十八  溶血試驗(yàn)　　實(shí)驗(yàn)二十九  血清總補(bǔ)體活性測(cè)定　　實(shí)驗(yàn)三十  補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒試驗(yàn)　第lO章  免疫標(biāo)記技術(shù)　　實(shí)驗(yàn)三十一  酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)　　實(shí)驗(yàn)三十二  酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)(EILISPOT)技術(shù)檢測(cè)淋巴細(xì)胞分泌活性　　實(shí)驗(yàn)三十三  間接免疫熒光法檢測(cè)人外周血T細(xì)胞亞群　　實(shí)驗(yàn)三十四  膠體金的制備　　實(shí)驗(yàn)三十五  免疫金的制備　　實(shí)驗(yàn)三十六  膠體金斑點(diǎn)層析技術(shù)檢測(cè)早期妊娠　　實(shí)驗(yàn)三十七  中性粒細(xì)胞吞噬功能的化學(xué)發(fā)光測(cè)定　第11章  免疫細(xì)胞的分離純化　　實(shí)驗(yàn)三十八  沉降法分離外周血白細(xì)胞　　實(shí)驗(yàn)三十九  密度梯度離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞　　實(shí)驗(yàn)四十  小鼠脾細(xì)胞的制備　　實(shí)驗(yàn)四十一  小鼠胸腺細(xì)胞的制備　　實(shí)驗(yàn)四十二  小鼠骨髓樹(shù)突狀細(xì)胞的制備　　實(shí)驗(yàn)四十三  小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的制備　第12章  吞噬細(xì)胞功能測(cè)定　　實(shí)驗(yàn)四十四  硝基四氮唑藍(lán)還原試驗(yàn)　　實(shí)驗(yàn)四十五  細(xì)菌計(jì)數(shù)法測(cè)定中性粒細(xì)胞吞噬功能　　實(shí)驗(yàn)四十六  巨噬細(xì)胞吞噬功能測(cè)定　　實(shí)驗(yàn)四十七  中性粒細(xì)胞趨化功能測(cè)定　第13章  超敏反應(yīng)　　實(shí)驗(yàn)四十八  豚鼠過(guò)敏反應(yīng)　　實(shí)驗(yàn)四十九  皮膚速發(fā)型超敏反應(yīng)　　實(shí)驗(yàn)五十  血清總IgE測(cè)定　　實(shí)驗(yàn)五十一  特異性IgE的測(cè)定第三篇  綜合性實(shí)驗(yàn)　第14章  多克隆抗體的制備　　實(shí)驗(yàn)五十二  免疫血清的制備　　實(shí)驗(yàn)五十三  免疫血清的鑒定與純化　第15章  單克隆抗體的制備　　實(shí)驗(yàn)五十四  動(dòng)物的選擇與免疫　　實(shí)驗(yàn)五十五  細(xì)胞融合　　實(shí)驗(yàn)五十六  雜交瘤的篩選與克隆　　實(shí)驗(yàn)五十七  單克隆抗體的制備與鑒定　　實(shí)驗(yàn)五十八  單克隆抗體Fab片段的制備　第16章  免疫印跡　　實(shí)驗(yàn)五十九  免疫印跡技術(shù)　第17章  免疫細(xì)胞檢測(cè)　　實(shí)驗(yàn)六十  溶血空斑試驗(yàn)　　實(shí)驗(yàn)六十一  APAAP橋聯(lián)酶標(biāo)法檢測(cè)T細(xì)胞亞群　　實(shí)驗(yàn)六十二  流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)T細(xì)胞亞群　第18章  免疫細(xì)胞功能檢測(cè)　　實(shí)驗(yàn)六十三  淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)　　實(shí)驗(yàn)六十四  混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)  買驗(yàn)六十五  NK細(xì)胞活性測(cè)定　　實(shí)驗(yàn)六十六  細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞活性測(cè)定　第19章  細(xì)胞因子的檢測(cè)　　實(shí)驗(yàn)六十七  白細(xì)胞介素-2活性的檢測(cè)　　實(shí)驗(yàn)六十八  腫瘤壞死因子的生物學(xué)活性檢測(cè)　第20章  細(xì)胞凋亡的檢測(cè)　　實(shí)驗(yàn)六十九  凝膠電泳法檢測(cè)小鼠胸腺細(xì)胞凋亡　　實(shí)驗(yàn)七十  末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法檢測(cè)細(xì)胞凋亡　　實(shí)驗(yàn)七十一  流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡第四篇  臨床免疫實(shí)驗(yàn)　第21章  感染性疾病的免疫學(xué)檢測(cè)　　實(shí)驗(yàn)七十二  IgM捕獲法檢測(cè)TORCH感染特異性IgM抗體　　實(shí)驗(yàn)七十三  雙抗原夾心ELISA法檢測(cè)人類免疫缺陷病毒抗體　　實(shí)驗(yàn)七十四  ELISA法檢測(cè)乙型肝炎病毒抗原及特異性抗體  買驗(yàn)七十五  IgM捕獲法檢測(cè)甲型肝炎病毒特異性IgM抗體　第22章  腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)  買驗(yàn)七十六  微粒子化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)甲胎蛋白　　實(shí)驗(yàn)七十七  微粒子化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)癌胚抗原  買驗(yàn)七十八  微粒子化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)其他腫瘤相關(guān)抗原　第23章  自身免疫性疾病的檢測(cè)  買驗(yàn)七十九  斑點(diǎn)酶免疫法檢測(cè)抗ENA抗體  買驗(yàn)八十  ELISA檢測(cè)抗甲狀腺球蛋白抗體　第24章  內(nèi)分泌疾病的免疫學(xué)檢測(cè)　　實(shí)驗(yàn)八十一  電化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)甲狀腺激素　　實(shí)驗(yàn)八十二  電化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)雌二醇　第25章  血液藥物濃度的檢測(cè)　　實(shí)驗(yàn)八十三  熒光偏振免疫法測(cè)定血液環(huán)孢素濃度　　實(shí)驗(yàn)八十四  熒光偏振免疫法測(cè)定血液卡馬西平濃度　　實(shí)驗(yàn)八十五  微粒子酶免分析法測(cè)定血液地高辛濃度第五篇  創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)　第26章　　實(shí)驗(yàn)的選題、設(shè)計(jì)、實(shí)施與總結(jié)　第27章  創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)參考選題附錄1  常用實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備簡(jiǎn)介附錄2  常用試劑配制

章節(jié)摘錄

第一篇 基本實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第1章 血液標(biāo)本的采集在免疫學(xué)的相關(guān)研究和臨床檢驗(yàn)中，常常需要收集人和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究和檢驗(yàn)分析，因此，正確采集人和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的血液標(biāo)本是免疫學(xué)最基本和最重要的操作技術(shù)。在標(biāo)本采集前，應(yīng)考慮檢測(cè)的需要，決定采血方法、所需血量及選用合適的抗凝劑。本章主要介紹人和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液標(biāo)本的采集，以及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死方法。實(shí)驗(yàn)一　人血液標(biāo)本的采集【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹空莆侦o脈采血的方法，了解皮膚采血法?！緦?shí)驗(yàn)原理】采集的血液標(biāo)本主要分為全血、血漿及血清等。1.全血保留血液的全部成分，由血細(xì)胞和血漿組成。抗凝全血主要用于免疫細(xì)胞的分離、血細(xì)胞檢查等。2.血漿抗凝全血離心除去血細(xì)胞后的成分，用于血漿生理性和病理性化學(xué)成分的測(cè)定。3.血清血液離體自然凝固后析出的液體部分，除纖維蛋白原等凝血因子在凝血時(shí)被消耗外，其他成分與血漿基本相同，更適用于大多數(shù)臨床免疫學(xué)檢查?！緦?shí)驗(yàn)材料】真空采血管（普通血清管、檸檬酸鈉或肝素抗凝管）、一次性雙向采血針（常用7號(hào)）、持針器、止血帶、三棱針或?qū)Ｓ谩安裳槨?、碘酊、消毒干棉簽?/pre>




編輯推薦
《免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)》分五篇共27章，包括85個(gè)實(shí)驗(yàn)，完全能夠滿足各層次、各專業(yè)免疫學(xué)教學(xué)的需求。其中基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)包含了現(xiàn)代免疫學(xué)的基本技術(shù)及科研中常用方法技術(shù)，特別是為創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)提供了基本技術(shù)。經(jīng)典驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)是免疫學(xué)最基本的、以驗(yàn)證理論為主的方法技術(shù)，能在單元教學(xué)時(shí)間內(nèi)完成，適合各專業(yè)本科學(xué)生教學(xué)，主要培養(yǎng)學(xué)生的基本操作技能。綜合性實(shí)驗(yàn)涉及多種技術(shù)，大多不能在單元教學(xué)時(shí)間內(nèi)完成，屬選修性質(zhì)的實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)學(xué)生的獨(dú)立工作能力和綜合分析能力。臨床免疫實(shí)驗(yàn)介紹了部分臨床常用免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)及其診斷意義，主要培養(yǎng)檢驗(yàn)專業(yè)學(xué)生的實(shí)際操作能力，或?yàn)槟承I(yè)研究生提供特別的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)以培養(yǎng)學(xué)生基本的科學(xué)研究能力為主，對(duì)象是研究生或本科生科研小組。





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