植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)

內(nèi)容概要

　　本書(shū)根據(jù)現(xiàn)代植物組織培養(yǎng)技術(shù)理論和方法編排了22個(gè)實(shí)驗(yàn)，包括培養(yǎng)基的配制、外植體表面消毒、器官分化、快繁技術(shù)、莖尖脫毒技術(shù)、微型薯誘導(dǎo)、花藥培養(yǎng)、人工種子、細(xì)胞培養(yǎng)、原生質(zhì)體培養(yǎng)及融合、水培技術(shù)、非試管快繁技術(shù)、遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)、轉(zhuǎn)基因植株鑒定等內(nèi)容。本書(shū)除基本實(shí)驗(yàn)外，還設(shè)置了多種植物的快繁、水培等技術(shù)，供學(xué)生實(shí)驗(yàn)時(shí)選擇參考。本書(shū)既突出植物組織培養(yǎng)基本實(shí)驗(yàn)技能，又增加了訓(xùn)練學(xué)生科研創(chuàng)新能力的綜合性實(shí)驗(yàn)。

書(shū)籍目錄

前言
實(shí)驗(yàn)一　玻璃器具等的清洗、烘干、包扎、滅菌
實(shí)驗(yàn)二　培養(yǎng)基母液的配制
實(shí)驗(yàn)三　培養(yǎng)基的配制、滅菌及分裝
實(shí)驗(yàn)四　外植體表面消毒和接種
實(shí)驗(yàn)五　愈傷組織的誘導(dǎo)與增殖
實(shí)驗(yàn)六　外植體不定芽的分化
實(shí)驗(yàn)七　常見(jiàn)植物離體快繁技術(shù)
實(shí)驗(yàn)八　莖尖脫毒技術(shù)
實(shí)驗(yàn)九　馬鈴薯試管微型薯的誘導(dǎo)
實(shí)驗(yàn)十　成熟胚培養(yǎng)
實(shí)驗(yàn)十一　花藥培養(yǎng)
實(shí)驗(yàn)十二　人工種子制作
實(shí)驗(yàn)十三　植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)
實(shí)驗(yàn)十四　植物細(xì)胞生長(zhǎng)和活力的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)十五　細(xì)胞微室培養(yǎng)技術(shù)
實(shí)驗(yàn)十六　原生質(zhì)體的分離和培養(yǎng)
實(shí)驗(yàn)十七　原生質(zhì)體融合
實(shí)驗(yàn)十八　植物水培技術(shù)
實(shí)驗(yàn)十九　植物非試管快繁技術(shù)
實(shí)驗(yàn)二十　農(nóng)桿菌介導(dǎo)的植物遺傳轉(zhuǎn)化
實(shí)驗(yàn)二十一　轉(zhuǎn)基因植株基因組DNA的提取
實(shí)驗(yàn)二十二　轉(zhuǎn)基因植株P(guān)CR鑒定
附錄一　植物組織培養(yǎng)常用培養(yǎng)基配方
附錄二　常見(jiàn)水培營(yíng)養(yǎng)液配方
附錄三　常見(jiàn)植物激素單位換算
附錄四　常見(jiàn)植物激素的配制和貯存
附錄五　常見(jiàn)抗生素的配制和貯存
主要參考文獻(xiàn)

章節(jié)摘錄

　　植物遺傳轉(zhuǎn)化是指將外源基因轉(zhuǎn)移到植物體內(nèi)并穩(wěn)定地整合表達(dá)與遺傳的過(guò)程。在這一過(guò)程中，建立穩(wěn)定、高效的遺傳轉(zhuǎn)化體系是實(shí)現(xiàn)某一植物遺傳轉(zhuǎn)化的先決條件。目前，遺傳轉(zhuǎn)化的方法有農(nóng)桿菌介導(dǎo)法、基因槍法、電擊法、花粉管通道法、PEG誘導(dǎo)融合法等，其中，農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化法是外源I）NA進(jìn)入植物細(xì)胞的最成功和應(yīng)用最廣泛的方法，農(nóng)桿菌可浸染大多數(shù)雙子葉植物和少數(shù)單子葉植物，甚至裸子植物。轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞的農(nóng)桿菌主要有兩類，即根癌農(nóng)桿菌已有研究表明，影響農(nóng)桿菌介導(dǎo)植物基因轉(zhuǎn)化的因素很多，農(nóng)桿菌菌株、植物基因型和外植體、培養(yǎng)方法、不同的選擇標(biāo)記等因素都影響農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化。目前報(bào)道已有許多植物通過(guò)農(nóng)桿菌的遺傳轉(zhuǎn)化獲得了轉(zhuǎn)基因植株或毛狀根。農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化工作分為植物表達(dá)載體的構(gòu)建、轉(zhuǎn)化系統(tǒng)的建立、目的基因的轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)化體的篩選與獲得、轉(zhuǎn)基因植株的分子檢測(cè)與轉(zhuǎn)基因植株的獲得。農(nóng)桿菌的培養(yǎng)、生長(zhǎng)狀態(tài)和純度對(duì)轉(zhuǎn)化具有重要作用。如果農(nóng)桿菌本身生長(zhǎng)不良，則其侵染能力大大下降。農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化過(guò)程為：先將外植體切割成小塊，然后將含傷口的小塊浸泡在制備好的轉(zhuǎn)化用農(nóng)桿菌菌液中，浸泡一定時(shí)間后，用吸水紙吸干水分，放到不添加抗生素的MS培養(yǎng)基中共培養(yǎng)。3d后，將共培養(yǎng)的外植體轉(zhuǎn)接到含有羧芐青霉素等脫菌抗生素的培養(yǎng)基上進(jìn)行外植體的脫菌培養(yǎng)。繼代多次，將殘留的農(nóng)桿菌殺死。后轉(zhuǎn)移到篩選培養(yǎng)基上篩選再生植株，轉(zhuǎn)化細(xì)胞在含相應(yīng)抗生素的培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng)，而非轉(zhuǎn)化細(xì)胞死亡。對(duì)生長(zhǎng)正常的轉(zhuǎn)化植株進(jìn)行分子生物學(xué)鑒定從而獲得轉(zhuǎn)基因植株。 　　……

圖書(shū)封面

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