分子生物學(xué)實驗

內(nèi)容概要

本書主要介紹分子生物學(xué)的基本操作技術(shù)與實驗手段，主要包括植物、動物、微生物基因組DNA的提取與鑒定，哺乳動物組織總RNA的提取與鑒定，質(zhì)粒DNA的提取與鑒定，PCR擴(kuò)增，分子雜交技術(shù)，限制性內(nèi)切酶消化，分子克隆全過程和基因文庫的構(gòu)建等實驗項目的原理及步驟。    本書是一本既具有一定的理論體系，又具有通用性和指導(dǎo)性作用的教學(xué)用書。本書主要面向高等院校，特別是應(yīng)用型本科院校生物科學(xué)、生物工程等相關(guān)專業(yè)的學(xué)生及分子生物學(xué)初級研究者。

書籍目錄

第1章 分子生物學(xué)實驗室規(guī)范及注意事項  1.1 分子生物學(xué)實驗室常用儀器設(shè)備  1.2 分子生物學(xué)實驗室操作規(guī)范  1.3 分子生物學(xué)實驗注意事項第2章 常用的檢測分析方法  2.1 分光光度法  2.2 電泳  實驗1 DNA濃度與純度的紫外分光光度法分析  實驗2 DNA的瓊脂糖凝膠電泳  實驗3 DNA的聚丙烯酰胺凝膠電泳第3章 植物基因組DNA的提取及鑒定  3.1 植物基因組DNA  3.2 植物基因組DNA的提取技術(shù)  實驗4 改進(jìn)SDS法提取植物基因組DNA  實驗5 CTAB法提取植物基因組DNA第4章 動物基因組DNA的提取及鑒定  4.1 動物基因組DNA  4.2 動物基因組DNA、的提取技術(shù)  實驗6 動物組織基因組DNA的提取  實驗7 血液基因組DNA的提取第5章 微生物基因組DNA的提取及鑒定  5.1 微生物基因組DNA  5.2 微生物基因組DNA的提取技術(shù)  實驗8 大腸桿菌基因組DNA的提取  實驗9 酵母基因組DNA的提取  實驗10 環(huán)境微生物基因組’DNA的提取第6章 質(zhì)粒DNA的提取及鑒定  6.1 質(zhì)粒  6.2 大腸桿菌質(zhì)粒DNA的提取技術(shù)  實驗11 堿裂解法小量制備質(zhì)粒DNA  實驗12 試劑盒抽提大腸桿菌質(zhì)粒  實驗13 質(zhì)粒DNA的大量制備第7章 哺乳動物組織總RNA的提取及鑒定  7.1 哺乳動物組織總RNA  7.2 哺乳動物組織總RNA的提取技術(shù)  7.3 總RNA提取中的關(guān)鍵問題  實驗14 哺乳動物組織總RNA的提取第8章 PCR基因擴(kuò)增及檢測  8.1 PCR技術(shù)的原理  8.2 PCR技術(shù)的發(fā)展歷程  8.3 PCR技術(shù)的種類  實驗15 綠色熒光蛋白基因的PCR擴(kuò)增  實驗16 乳鐵蛋白基因的PCR擴(kuò)增  實驗17 查爾酮合成酶基因的PCR擴(kuò)增  實驗18 逆轉(zhuǎn)錄PCR擴(kuò)增第9章 分子雜交  9.1 分子雜交的原理  9.2 分子雜交的發(fā)展歷程  9.3 分子雜交的種類  實驗19 Southern雜交  實驗20 Northern雜交  實驗21 Western雜交第10章 限制性內(nèi)切酶消化  10.1 限制性內(nèi)切酶的發(fā)現(xiàn)  10.2 限制性內(nèi)切酶的命名及種類  10.3 限制性內(nèi)切酶的反應(yīng)體系  10.4 限制性內(nèi)切酶酶切圖譜  實驗22 質(zhì)粒的限制性內(nèi)切酶消化  實驗23 λDNA的限制性內(nèi)切酶消化第11章 目的基因的分離純化  實驗24 乙醇沉淀法純化PCR擴(kuò)增產(chǎn)物  實驗25 硅膠膜吸附法純化PCR擴(kuò)增產(chǎn)物  實驗26 外源DNA的瓊脂糖凝膠電泳回收第12章 DNA的體外重組  12.1 常用的載體  12.2 外源DNA與載體的連接方法  實驗27 PCR產(chǎn)物直接克隆  實驗28 黏性末端的連接第13章 感受態(tài)細(xì)胞的制備及轉(zhuǎn)化  13.1 轉(zhuǎn)化  13.2 感受態(tài)細(xì)胞的制備方法  實驗29 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備及轉(zhuǎn)化  實驗30 重組DNA的藍(lán)白斑篩選第14章 外源基因的誘導(dǎo)表達(dá)  14.1 表達(dá)系統(tǒng)  14.2 表達(dá)載體  14.3 外源基因誘導(dǎo)表達(dá)的優(yōu)化  實驗31 外源基因在大腸桿菌中的誘導(dǎo)表達(dá)  實驗32 蛋白質(zhì)的SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳第15章 基因文庫的構(gòu)建  15.1 基因文庫的構(gòu)建方法  15.2 基因文庫的應(yīng)用  實驗33 植物cDNA文庫的構(gòu)建附錄 常用試劑母液配制表

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