細胞與分子生物學實驗指南

內容概要

　　《細胞與分子生物學實驗指南》主要包括兩個部分。第一部分即前十個實驗是細胞生物學實驗部分，主要是根據(jù)編者多年的實驗教學經(jīng)驗以及實驗教學課程目標的設置而選擇了具有代表性的十個實驗。它們涵蓋了細胞各種常用顯微鏡的使用技術，細胞培養(yǎng)技術，細胞免疫組化技術，細胞轉化技術，等等。這些實驗凝聚了編者多年實驗教學的實踐經(jīng)驗與體會，所以操作性較強。這些實驗不但包括細胞生物學基本的技術訓練，而且還注重在基本實驗中融入綜合性、探索性的設計，使學生在科學思維方法和獨立解決問題的能力方面得到提高。第二部分即后十個實驗是分子生物學實驗技術，主要是根據(jù)編者長年從事分子生物學科學研究而積累的豐富的科研經(jīng)歷，選擇了近些年來發(fā)展起來的較為實用而前沿的分子生物學技術，它們包括免疫共沉淀、GST Pull-down Assay、DNA甲基化、凝膠遷移實驗、RNA干涉等等。而分子生物學基本的實驗技術也通過編者用心的實驗設計而很好地融入了這些前沿的實驗技術中，這一點和絕大多數(shù)已出版的只介紹分子生物學基本的傳統(tǒng)技術的實驗指導是不同的。而這些前沿技術已在現(xiàn)代分子生物學研究中越來越普遍地被使用。這些較為前沿的實驗技術中很多內容在現(xiàn)有的出版物中是很難找到的，無疑《細胞與分子生物學實驗指南》是了解這些前沿技術的有意義的參考資料，同時所設置的實驗訓練不但開闊了學生的視野，而且也使學生能夠更好地適應生命科學技術發(fā)展的需要。

書籍目錄

實驗一 細胞形態(tài)結構的光學顯微鏡觀察實驗二 動物細胞微絲、中間纖維的顯微觀察實驗三 植物細胞染色體標本的制作與觀察實驗四 動物細胞染色體標本的制作及G帶顯帶技術實驗五 動物細胞的傳代培養(yǎng)實驗六 動物細胞的原代培養(yǎng)實驗七 動物培養(yǎng)細胞生長曲線的測定實驗八 植物的組織培養(yǎng)技術實驗九 細胞凋亡的形態(tài)學觀察及流式細胞技術檢測實驗十 電擊法轉化GFP基因于鹽藻細胞實驗十一Western blot實驗檢測p53蛋白在不同分裂時期的細胞中的表達實驗十二 RNA的提取及Northern雜交實驗十三 免疫共沉淀檢測p2l和PCNA兩種蛋白的相互作用實驗十四 GST Pull-down Assay檢測ISL-1與BETA2兩種蛋白的相互作用實驗十五 亞硫酸氫鈉法檢測DNA甲基化實驗十六 動物細胞脂質體轉染及熒光素酶檢測實驗十七 利用凝膠遷移實驗(EMSA)分析基因表達調控作用元件實驗十八 染色質免疫共沉淀技術實驗十九 RBP-Pull Down技術實驗二十 RNA干涉實驗技術附錄參考文獻

章節(jié)摘錄

版權頁：插圖：1實驗背景與原理植物組織培養(yǎng)是指將離體的植物器官（根、莖、葉、花藥等），組織（胚乳、花藥組織），細胞（包括花粉）等在模擬機體自然生理條件下在體外進行培養(yǎng)，使之生存或生長成為完整植株的技術。這種組織培養(yǎng)的植物又叫試管植物。植物組織培養(yǎng)的理論依據(jù)是植物細胞的全能性。植物細胞的全能性是指任何具有完整的細胞核的植物細胞，都擁有形成一個完整個體所必需的全部遺傳信息，理論上，它們如受精卵一樣，都具有經(jīng)過分裂、分化形成各種組織和細胞，最終發(fā)育成一個完整的個體的能力。全能性說明的是一種可能性，而全能性的表達是需要一定條件的。細胞只有在適當條件下才能表達出全能性來，這種全能性表達的難易程度在不同的細胞之間也有很大的差別。一般說來，高度分化的動物細胞通常是不可逆的，很難再表達這種全能性。而植物分化組織中的靜止細胞在適當?shù)拇碳l件下，會改變原來的發(fā)育途徑，逐步逆轉其原有的分化狀態(tài)，轉變?yōu)榫哂蟹稚芰Φ呐咝约毎?，這個過程就稱為脫分化。已經(jīng)脫分化的細胞在一定條件下，又可經(jīng)過愈傷組織或胚狀體，再分化出根和芽，形成完整植株，這一過程叫做再分化。組織培養(yǎng)的過程，就是植物細胞的脫分化和再分化的過程。愈傷組織就是在植物細胞脫分化和再分化這一過程中衍生的能迅速增殖，無特定結構和功能的薄壁組織細胞團。植物細胞全能性的實現(xiàn)途徑有直接和間接的途徑。一般從含有腋芽的莖段外植體上，可直接誘導腋生芽，分化為完整植株。這也是最常用的途徑之一，可保持品種的原有特性，特別適合于苗木的快速繁殖。從不含腋芽的器官，如葉片、莖段上，需誘導細胞經(jīng)過脫分化，再誘導出不定芽，間接分化形成完整植株。

編輯推薦

《細胞與分子生物學實驗指南》是由大連理工大學出版社出版的。

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