生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教程

前言

　　生命科學(xué)是21世紀(jì)各國爭先發(fā)展的學(xué)科之一，要實(shí)現(xiàn)我國生命科學(xué)的跨越式發(fā)展，培養(yǎng)具有國際競爭能力的創(chuàng)新型人才是關(guān)鍵。對(duì)于生命科學(xué)創(chuàng)新型人才的培養(yǎng)，實(shí)踐教學(xué)是最佳切入點(diǎn)，通過實(shí)踐教學(xué)不僅可以向?qū)W生傳授生命科學(xué)知識(shí)，使其掌握嫻熟的實(shí)驗(yàn)技能，培養(yǎng)其綜合分析問題和解決問題能力，而且對(duì)于培養(yǎng)學(xué)生團(tuán)結(jié)合作、嚴(yán)謹(jǐn)求實(shí)、勇于創(chuàng)新的科學(xué)品質(zhì)和為人類造福的價(jià)值觀具有重要作用。為了適應(yīng)社會(huì)發(fā)展對(duì)人才培養(yǎng)的需要，我們不斷深化實(shí)驗(yàn)教學(xué)體系、內(nèi)容和方法的系統(tǒng)改革，并加強(qiáng)與之相適應(yīng)的配套教材建設(shè)，使實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革更有利于學(xué)生知識(shí)、能力和素質(zhì)的全面協(xié)調(diào)發(fā)展?！　”窘滩淖?999年第一版、2004年第二版出版以來，深受讀者歡迎，已被多所高校所采用。隨著科學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展，新知識(shí)、新技術(shù)和新方法不斷誕生。為了保持實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的先進(jìn)性，適應(yīng)新形勢下高素質(zhì)創(chuàng)新型人才培養(yǎng)的需求，經(jīng)征求廣大讀者使用意見，結(jié)合生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革的實(shí)踐，決定對(duì)本教材再次修訂。第三版修訂中仍然秉承“加強(qiáng)基礎(chǔ)、拓寬知識(shí)、培養(yǎng)能力、激勵(lì)個(gè)性”的人才培養(yǎng)思想，堅(jiān)持有利于學(xué)生自主學(xué)習(xí)、合作學(xué)習(xí)和研究性學(xué)習(xí)的原則，在保持第二版整體實(shí)驗(yàn)教學(xué)體系基礎(chǔ)上，在實(shí)驗(yàn)內(nèi)容上做了部分調(diào)整和部分實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的修改。　　本書是國家精品課程--生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的配套立體化教材之一，該系列教材包括：①《生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教程(第三版)(I)--植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)、動(dòng)物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)、微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)、免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)》；②《生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教程(第三版)(Ⅱ)一遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)》；③《高校教學(xué)實(shí)驗(yàn)室管理》；④《現(xiàn)代生命科學(xué)實(shí)踐教學(xué)改革的研究》；⑤《生物學(xué)綜合實(shí)驗(yàn)網(wǎng)絡(luò)教程》(光盤)；⑥普通高等教育“十一五”國家級(jí)規(guī)劃教材《生命科學(xué)儀器使用技術(shù)教程》，共同組成生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)系統(tǒng)的配套教材?！　”緯抻喌膶?shí)驗(yàn)項(xiàng)目選擇設(shè)計(jì)時(shí)，結(jié)合“生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)”國家精品課程的建設(shè)和生物學(xué)自身的特點(diǎn)，按基本技術(shù)、宏觀(個(gè)體)水平、細(xì)胞水平和分子水平4個(gè)層次統(tǒng)籌設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目，避免了內(nèi)容的重復(fù)，節(jié)省了學(xué)時(shí)。本書注重各門實(shí)驗(yàn)技術(shù)和實(shí)驗(yàn)方法的合理綜合，注重實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與科研、生產(chǎn)和實(shí)際應(yīng)用的密切聯(lián)系，體現(xiàn)基礎(chǔ)與前沿、經(jīng)典與現(xiàn)代的有機(jī)結(jié)合，有利于學(xué)生自主學(xué)習(xí)、合作學(xué)習(xí)和研究性學(xué)習(xí)。同時(shí)，每門實(shí)驗(yàn)課后均設(shè)有設(shè)計(jì)創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)?！　〉?分冊(cè)按植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)、動(dòng)物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)、微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)、免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)等實(shí)驗(yàn)內(nèi)容分為5篇；第Ⅱ分冊(cè)按遺傳學(xué)、生物化學(xué)、分子生物學(xué)等實(shí)驗(yàn)內(nèi)容分為3篇。每篇從基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)、綜合性實(shí)驗(yàn)和設(shè)計(jì)創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)3個(gè)層面上設(shè)置實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。每個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目按相關(guān)理論知識(shí)、目的要求、實(shí)驗(yàn)原理、材料與器材、實(shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)結(jié)果、注意事項(xiàng)、思考題等進(jìn)行了系統(tǒng)編排。

內(nèi)容概要

本書在加強(qiáng)基本技術(shù)和基本方法介紹的同時(shí)，注重各門實(shí)驗(yàn)技術(shù)和實(shí)驗(yàn)方法的合理綜合，注重實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與科研、生產(chǎn)和實(shí)際應(yīng)用的密切聯(lián)系，體現(xiàn)基礎(chǔ)與前沿、經(jīng)典與現(xiàn)代的有機(jī)結(jié)合。共設(shè)49個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。
本書按植物生物學(xué)、動(dòng)物生物學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)和免疫學(xué)等實(shí)驗(yàn)內(nèi)容分為五篇，每篇從基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)、綜合性實(shí)驗(yàn)和設(shè)計(jì)創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)三個(gè)層面設(shè)置實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目，每個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目按相關(guān)理論知識(shí)、目的要求、實(shí)驗(yàn)原理、材料與器材、實(shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)結(jié)果、注意事項(xiàng)、思考題等進(jìn)行了系統(tǒng)編排。每門實(shí)驗(yàn)課程內(nèi)容后，設(shè)有設(shè)計(jì)創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)，列出選題范圍和要求，并在附錄中列出設(shè)計(jì)創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)實(shí)施程序及要求。
本教材是高校生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)和教學(xué)改革急需的教材，也可作為生命科學(xué)科技工作者的工具參考書。為大中專院校生命科學(xué)相關(guān)專業(yè)和非生物學(xué)相關(guān)專業(yè)的師生、科研、企事業(yè)單位的人員提供參考。

書籍目錄

第三版前言
第二版前言
第一版前言
第一篇 植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
 實(shí)驗(yàn)一 植物組織、器官的結(jié)構(gòu)觀察
 一 植物組織的結(jié)構(gòu)觀察
 二 被子植物營養(yǎng)器官的結(jié)構(gòu)觀察
 三 被子植物繁殖器官的結(jié)構(gòu)觀察
 實(shí)驗(yàn)二 植物理化性質(zhì)的測定
 一 植物組織水勢的測定（小液流法）
 二 植物呼吸強(qiáng)度的測定（小籃子法）
 三 葉綠素的提取及性質(zhì)測定
 四 種子發(fā)芽率的快速測定
 實(shí)驗(yàn)三 種子植物標(biāo)本的采集、制作與保存
 實(shí)驗(yàn)四 設(shè)計(jì)創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)
第二篇 動(dòng)物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
 實(shí)驗(yàn)一 動(dòng)物解剖及形態(tài)觀察實(shí)驗(yàn)
 一 眼蟲及草履蟲觀察
 二 蛔蟲解剖及橫切片觀察
 三 蝗蟲外形及內(nèi)部解剖
 四 鯉魚外形及內(nèi)部解剖
 五 蟾蜍外形及內(nèi)部解剖
 六 家雞外形及內(nèi)部解剖
 七 家兔外形及內(nèi)部解剖
 實(shí)驗(yàn)二 動(dòng)物機(jī)能實(shí)驗(yàn)
 一 呼吸運(yùn)動(dòng)調(diào)節(jié)
 二 心搏的觀察、描記及期前收縮和代償間歇
 三 坐骨神經(jīng)—腓腸肌標(biāo)本制備及骨胳肌收縮性質(zhì)的觀察
 四 蛙心室肌細(xì)胞動(dòng)作電位以及心電與心肌收縮的時(shí)相關(guān)系
 五 神經(jīng)干的動(dòng)作電位、傳導(dǎo)速度及興奮性測定
 六 反射弧的分析
 七 小腦受傷動(dòng)物運(yùn)動(dòng)功能障礙的觀察
 八 大腦皮層運(yùn)動(dòng)機(jī)能定位
 九 血壓調(diào)節(jié)
 十 去大腦僵直
 實(shí)驗(yàn)三 人體機(jī)能檢測實(shí)驗(yàn)
 一 人體心音聽診
 二 人體血壓和肺活量測定
 三 人體血型的鑒定
 實(shí)驗(yàn)四 設(shè)計(jì)創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)
第三篇 微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
 實(shí)驗(yàn)一 土壤中微生物的分離純化、培養(yǎng)觀察及保藏
 一 常用培養(yǎng)基的制備、滅菌
 二 土壤中微生物的分離純化及培養(yǎng)技術(shù)
 三 細(xì)菌的形態(tài)觀察
 四 細(xì)菌細(xì)胞的生理生化反應(yīng)
 五 大腸桿菌生長曲線的測定
 六 放線菌、霉菌和酵母菌的形態(tài)觀察
 七 微生物的測微技術(shù)
 八 微生物菌種的保藏
 實(shí)驗(yàn)二 厭氧菌的培養(yǎng)技術(shù)
 一 用厭氧袋法培養(yǎng)丙酮丁醇梭菌
 二 厭氧罐培養(yǎng)法
 三 針筒厭氧培養(yǎng)法
 實(shí)驗(yàn)三 細(xì)菌細(xì)胞數(shù)量的測定
 一 直接計(jì)數(shù)法
 二 光電比濁計(jì)數(shù)法
 三 平板菌落計(jì)數(shù)法
 四 多管發(fā)酵測定法
 五 干重比色測定法
 實(shí)驗(yàn)四 微生物誘變及突變株的篩選
 一 紫外線與亞硝基胍的誘變效應(yīng)
 二 抗藥性突變株的篩選
 三 酵母菌營養(yǎng)缺陷型的篩選
 實(shí)驗(yàn)五 昆蟲病毒多角體的染色與觀察
 實(shí)驗(yàn)六 大腸桿菌噬菌體的分離、純化及效價(jià)測定
 實(shí)驗(yàn)七 動(dòng)物病毒的雞胚培養(yǎng)
 實(shí)驗(yàn)八 抗菌肽效價(jià)的生物測定
 實(shí)驗(yàn)九 乳酸發(fā)酵與乳酸菌飲料的制備
 實(shí)驗(yàn)十 響應(yīng)面法優(yōu)化大腸桿菌的發(fā)酵條件
 實(shí)驗(yàn)十一 利用微生物快速測定儀對(duì)微生物進(jìn)行分類
 實(shí)驗(yàn)十二 細(xì)菌的藥敏試驗(yàn)——紙片擴(kuò)散法
 實(shí)驗(yàn)十三 柯赫法則——病原接種與致病性證實(shí)實(shí)驗(yàn)
 實(shí)驗(yàn)十四 葡萄球菌的分離與鑒定
 實(shí)驗(yàn)十五 設(shè)計(jì)創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)
第四篇 細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
 實(shí)驗(yàn)一 徒手切片、裝片、涂片的制作及細(xì)胞結(jié)構(gòu)的觀察
 一 徒手切片的制作及植物細(xì)胞觀察
 二 腸系膜裝片的制備及脂肪細(xì)胞的染色觀察
 三 血細(xì)胞涂片的制備及細(xì)胞形態(tài)觀察
 四 活體染色及線粒體、液泡系的觀察
 五 細(xì)胞內(nèi)酸性蛋白質(zhì)和堿性蛋白質(zhì)的規(guī)察
 實(shí)驗(yàn)二 石蠟切片的制備及細(xì)胞的染色觀察
 一 石蠟切片的制備
 二 細(xì)胞內(nèi)多糖的PAS反應(yīng)
 三 DNA的Feulgen反應(yīng)
 四 Brachet反應(yīng)——細(xì)胞內(nèi)DNA、RNA的顯示
 實(shí)驗(yàn)三 細(xì)胞器的熒光標(biāo)記技術(shù)
 一 熒光顯微鏡觀察口腔上皮細(xì)胞
 二 細(xì)胞骨架的熒光標(biāo)記
 三 紡錘體的免疫熒光標(biāo)記
 四 利用脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染技術(shù)對(duì)HeLq細(xì)胞中重組GFP進(jìn)行觀察
 實(shí)驗(yàn)四 電鏡制片技術(shù)
 一 超薄切片的制備
 二 掃描電鏡樣品的制備
 實(shí)驗(yàn)五 免疫肢體金技術(shù)
 實(shí)驗(yàn)六 植物組織及細(xì)胞的培養(yǎng)
 一 植物愈傷組織的誘導(dǎo)及分化
 二 植物細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)
 三 原生質(zhì)體的分離、融合與培養(yǎng)
 實(shí)驗(yàn)七 動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)
 一 貼壁細(xì)胞的傳代培養(yǎng)
 二 小鼠胚胎細(xì)胞的原代培養(yǎng)
 三 細(xì)胞的融合
 四 細(xì)胞凍存與復(fù)蘇
 實(shí)驗(yàn)八 細(xì)胞的分離與鑒定
 一 細(xì)胞器的分級(jí)分離
 二 玉米線粒體的分離與觀察
 三 葉綠體分離及離體葉綠體對(duì)染料的還原作用
 實(shí)驗(yàn)九 細(xì)胞生理性質(zhì)實(shí)驗(yàn)
 一 細(xì)胞膜透性觀察
 二 巨噬細(xì)胞吞噬現(xiàn)象的觀察
 實(shí)驗(yàn)十 細(xì)胞凋亡相關(guān)實(shí)驗(yàn)
 一 細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)觀察
 二 凋亡細(xì)胞的碘化丙啶（PI）排斥分析法
 三 細(xì)胞群染色體DNA斷裂的測定
 實(shí)驗(yàn)十一 利用RT-PCR技術(shù)檢測HeLa細(xì)胞中B-actin的表達(dá)
 實(shí)驗(yàn)十二 新生大鼠心臟細(xì)胞的分離和培養(yǎng)
 實(shí)驗(yàn)十三 哺乳動(dòng)物早熟染色體凝聚誘導(dǎo)
 實(shí)驗(yàn)十四 設(shè)計(jì)創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)
第五篇 免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)
 實(shí)驗(yàn)一 淋巴細(xì)胞功能檢測
 一 淋巴細(xì)胞的分離和計(jì)數(shù)
 二 T淋巴細(xì)胞功能檢測——轉(zhuǎn)化試驗(yàn)
 三 B淋巴細(xì)胞功能檢測——溶血空斑試驗(yàn)
 實(shí)驗(yàn)二 NK細(xì)胞功能檢測
 實(shí)驗(yàn)三 抗體的制備——多克隆抗體的制備
 一 抗原的制備和純化
 二 動(dòng)物的免疫
 三 免疫血清的分離和純化
 四 血清抗體效價(jià)的測定
 實(shí)驗(yàn)四 抗體的制備——單克隆抗體的制備
 實(shí)驗(yàn)五 抗原抗體反應(yīng)——凝集反應(yīng)
 直接凝集法測血型抗體效價(jià)（示范教學(xué)）
 實(shí)驗(yàn)六 抗原抗體反應(yīng)——沉淀反應(yīng)
 一 單向免疫擴(kuò)散（single immunodiffLlsion）
 二 雙向免疫擴(kuò)散（doLlble immtmodiffusion）
 三 免疫電泳（immlmoelectrophoresis）
 實(shí)驗(yàn)七 抗原抗體反應(yīng)——補(bǔ)體介導(dǎo)細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)
 實(shí)驗(yàn)八 免疫標(biāo)記技術(shù)——ELISA（間接法）
 實(shí)驗(yàn)九 免疫標(biāo)記——免疫組織化學(xué)技術(shù)
 實(shí)驗(yàn)十 免疫標(biāo)記——免疫印記雜交技術(shù)
 實(shí)驗(yàn)十一 細(xì)胞因子檢測技術(shù)
 實(shí)驗(yàn)十二 設(shè)計(jì)創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)
主要參考文獻(xiàn)
附錄
 附錄1 玻璃儀器的洗滌及各種洗滌液的配制
 附錄2 培養(yǎng)基的常規(guī)配制程序
 附錄3 微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)試劑和溶液的配制
 附錄4 微生物學(xué)常用染液的配制
 附錄5 微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用培養(yǎng)基的配制
 附錄6 細(xì)胞生物學(xué)培養(yǎng)基劑配制方法
 附錄7 細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)試劑配制
 附錄8 設(shè)計(jì)創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)程序與要求

章節(jié)摘錄

版權(quán)頁：插圖：①周皮：為老根最外面的幾層細(xì)胞，細(xì)胞徑向排列整齊，橫切面多少呈扁方形。其外面的幾層細(xì)胞被染成棕紅色，這是木栓層；其內(nèi)方有一層被染成藍(lán)綠色的扁方形薄壁細(xì)胞，內(nèi)有原生質(zhì)體，這是木栓形成層；栓內(nèi)層位于木栓形成層之內(nèi)側(cè)，由較大的薄壁細(xì)胞構(gòu)成。初生韌皮部已被擠破，常分辨不清。②次生維管組織：在周皮之間被染成藍(lán)綠色的部分是次生韌皮部，包括篩管、伴胞、韌皮薄壁細(xì)胞及少量略呈紅色的韌皮纖維。注意在橫切面上韌皮薄壁細(xì)胞與篩管分子的形態(tài)相似，常不易區(qū)分.此外，有許多薄壁細(xì)胞在徑向方向上排列成行，呈放射狀的倒三角形，是韌皮射線，起著橫向運(yùn)輸?shù)淖饔谩Ｔ跈M切面上占主要部分的是被染成紅色的次生一小質(zhì)部，它包括導(dǎo)管、管胞、木纖維和木薄壁細(xì)咆，其中導(dǎo)管易于辨認(rèn)，是一些口徑大、被染成紅色原生質(zhì)體解體的死細(xì)胞。管胞和木纖維在橫切面上口徑較小，可與導(dǎo)管區(qū)分，一般也被染成紅色，但二者之間不易分辨。此外，在木質(zhì)部中有一些呈徑向排列。被染成綠色的薄壁細(xì)胞，稱木射線。木射線與韌皮射線是相通的，合稱維管射線。在次生木質(zhì)部與次生韌皮部之間是維管形成層，被染成淺綠色，有幾層扁平的薄壁細(xì)胞。實(shí)際上形成層只有一層細(xì)胞，而我們觀察到的是多層細(xì)胞，這是因?yàn)樾纬蓪臃至研纬傻挠啄奂?xì)胞尚未分化成木質(zhì)部和韌皮部的各種細(xì)胞，因此與形成層不易區(qū)分。

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