分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法與技巧

內(nèi)容概要

不同于傳統(tǒng)的相關(guān)圖書，本書主要介紹編寫者們在近20年內(nèi)進(jìn)行分子生物學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)時，具體所采用的實(shí)驗(yàn)方案和技巧，是實(shí)用型實(shí)驗(yàn)方案的匯集。本書不求“新”：不追逐目前國際上的研究熱點(diǎn)；也不求“全”：不是分子生物學(xué)的必備手冊；只求“通”和“透”：每個實(shí)驗(yàn)均分為概述、實(shí)驗(yàn)方案(一套或根據(jù)其他條件而定的多套方案)、材料試劑(器皿和試劑等)、相關(guān)知識(背景知識、關(guān)鍵因素、時間安排、預(yù)期結(jié)果、參考文獻(xiàn))等四個方面的內(nèi)容，力求將每一個實(shí)驗(yàn)講透。無論對于經(jīng)驗(yàn)豐富的研究者還是初學(xué)者，本書都能給予一定的啟迪。

書籍目錄

第1章  實(shí)驗(yàn)前后的注意事項(xiàng)和行為準(zhǔn)則第一部分  DNA相關(guān)的操作  第2章  質(zhì)粒DNA的相關(guān)實(shí)驗(yàn)  第3章  聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)  第4章  限制性內(nèi)切酶的特性及應(yīng)用  第5章  基因組DNA的提取  第6章  分子探針及Southern雜交  第7章  基因組DNA的突變分析第二部分  RNA相關(guān)的操作  第8章  RNA的提取和cDNA合成  第9章  尋找差異表達(dá)基因方法——SSH法  第10章  全長基因的克隆——SMART技術(shù)  第11章  Northern Blot技術(shù)  第12章  siRNA的應(yīng)用  第13章  RNA酶保護(hù)實(shí)驗(yàn)第三部分  蛋白質(zhì)相關(guān)的操作  第14章  蛋白質(zhì)分離、鑒定相關(guān)技術(shù)  第15章  染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)(ChIP)  第16章  蛋白復(fù)合體的分離與鑒定  第17章  免疫沉淀  第18章  免疫熒光染色技術(shù)第四部分  細(xì)胞生物學(xué)相關(guān)的操作  第19章  外源基因在原核生物中的表達(dá)  第20章  外源基因在真核細(xì)胞中的表達(dá)  第21章  轉(zhuǎn)基因植物  第22章  轉(zhuǎn)基因動物技術(shù)  第23章  細(xì)胞凋亡的分子生物學(xué)檢測方法附錄  分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室安全及注意事項(xiàng)

章節(jié)摘錄

　?。?）要有基本的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣，所有的記錄必須清楚。要時刻清楚知道自己所做實(shí)驗(yàn)的一切，認(rèn)真做好各項(xiàng)標(biāo)記，怎么詳細(xì)都不為過。筆者有一個朋友，不到30歲就成了耶魯大學(xué)的助理教授，這對從事生物學(xué)研究的科研工作者來說是相當(dāng)拔尖的（目前美國生物學(xué)的助理教授，絕大多數(shù)都接受過5～6年的博士教育和4年以上的博士后培養(yǎng)），他成功的秘笈之一就是有刻版印刷樣的實(shí)驗(yàn)記錄?！　。?）實(shí)驗(yàn)中所用的試劑一定要專用，盡可能使用自己一個人所有的試劑。所有的試劑都自己配，出了問題才容易找原因。所有的東西都要即時標(biāo)記好，新到的試劑應(yīng)馬上標(biāo)明到達(dá)日期，這樣能確保實(shí)驗(yàn)所用的試劑有效。所有配制的試劑都要標(biāo)明三要素：藥品名稱、濃度、配制日期，同時還得標(biāo)明配制者的名字、試劑的批號等。所有的實(shí)驗(yàn)用具都不要輕易用別人的；萬一要用到時須先打招呼，且詳細(xì)記錄。第一次用到公共試劑時要注意質(zhì)檢，并注明相關(guān)的要素：配制時間、配制者、是否用過。要做好小離心管的標(biāo)記，同時記錄本上也應(yīng)有相應(yīng)詳細(xì)情況的登記。重要的試劑須再加貼一張標(biāo)簽紙，用透明膠帶貼在字的外面，以免在冰箱中反復(fù)凍融而使字跡模糊?！　。?）認(rèn)真做好實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備工作。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)認(rèn)真設(shè)計，包括試劑、儀器的準(zhǔn)備，實(shí)驗(yàn)方案的設(shè)計等。盡可能完備自己的實(shí)驗(yàn)方案。首先必須好好設(shè)計實(shí)驗(yàn)，做什么、怎么做都應(yīng)該心里清楚。仔細(xì)查閱有關(guān)的文獻(xiàn)資料，仔細(xì)分析、比較已有的多個相同或相似的實(shí)驗(yàn)方案，憑自己的專業(yè)知識選擇其中的一個；同時向做過類似實(shí)驗(yàn)的人請教，他們對實(shí)驗(yàn)的感性與理性認(rèn)識無疑是極有幫助的。仔細(xì)準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)前的一切，爭取一步到位。實(shí)驗(yàn)前最好做一份詳盡的試驗(yàn)流程圖并貼在試驗(yàn)臺前，這是科研的“尋寶圖”。需要特別注意的地方要特別標(biāo)注，這樣可以隨時參照。有計劃地安排時間，在有限的時間內(nèi)有效地做更多的工作?！　。?）盡量注意節(jié)約資源，保護(hù)環(huán)境。科學(xué)研究本身的消耗極大，同時又會給環(huán)境帶來污染。因此，如果對其他實(shí)驗(yàn)沒有什么大的影響的話，有些實(shí)驗(yàn)材料應(yīng)盡可能回收利用，這樣也能夠減少對環(huán)境的污染，如PCR擴(kuò)增用過的槍頭完全可以用于EB電泳加樣。　　……

編輯推薦

　　《分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法與技巧》是實(shí)用型分子生物學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)方案的匯集。全書共分四部分二十三章，內(nèi)容涉及DNA相關(guān)的操作，RNA相關(guān)的操作，蛋白質(zhì)相關(guān)的操作以及細(xì)胞生物學(xué)相關(guān)的操作。無論對于經(jīng)驗(yàn)豐富的研究者還是初學(xué)者，本書都能給予一定的啟迪。

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