生物工程實驗技術(shù)

內(nèi)容概要

《生物工程實驗技術(shù)》的編寫主要從實驗設(shè)計出發(fā)，以發(fā)酵過程控制、產(chǎn)物提取和分離純化為主線，突出每個實驗的基本原理、操作技能及數(shù)據(jù)處理方法?！渡锕こ虒嶒灱夹g(shù)》共7章，分別為實驗室與實驗的一般規(guī)則、生物過程參數(shù)檢測與控制、發(fā)酵工程技術(shù)、酶工程技術(shù)、細(xì)胞工程技術(shù)、基因工程技術(shù)和生物產(chǎn)品分離純化，每章都有相應(yīng)的參考文獻(xiàn)，書后還摘編了生物工程實驗常用的附錄。目前，為適應(yīng)“厚基礎(chǔ)、重應(yīng)用、高工程素質(zhì)”的人才培育模式，大多高校的生物工程及其相關(guān)專業(yè)均開設(shè)有綜合大實驗課程，教學(xué)一般采取連續(xù)課時，《生物工程實驗技術(shù)》為此課程提供了具有代表性的、成套的綜合大實驗內(nèi)容，便于教學(xué)中選用。
《生物工程實驗技術(shù)》可作為高等院校生物工程、生物科學(xué)、食品科學(xué)、微生物等專業(yè)教學(xué)用書，也可供微生物發(fā)酵行業(yè)有關(guān)研究人員、企業(yè)技術(shù)人員等參考。

作者簡介

常景玲、華承偉、孫婕、陳建軍

書籍目錄

前言第1章 實驗室與實驗的一般規(guī)則1.1 實驗室一般規(guī)則1.2 實驗方案的確定1.3 實驗的實施1.4 數(shù)據(jù)處理與分析1.5 生物反應(yīng)過程的優(yōu)化與放大1.6 實驗文獻(xiàn)與網(wǎng)絡(luò)資源參考文獻(xiàn)第2章 生物過程參數(shù)的檢測與控制實驗2.1 生物量的測定實驗2.2 微生物菌體密度的測定實驗2.3 亞硫酸鹽法測定體積溶氧系數(shù)實驗2.4 動態(tài)法測定體積溶氧系數(shù)實驗2.5 發(fā)酵液黏度的測定實驗2.6 酸度和pH的測定實驗2.7 總糖、還原糖含量的測定實驗2.8 攪拌功率的測定實驗2.9 氨基氮和銨離子含量的測定實驗2.10 溶磷含量的測定實驗2.11 生物效價的測定實驗2.12 在線溶氧電極測發(fā)酵體系臨界溶氧濃度實驗2.13 發(fā)酵廢液COD的測定參考文獻(xiàn)第3章 發(fā)酵工程技術(shù)3.1 原料制備技術(shù)實驗3.1 去離子水的制備實驗3.2 淀粉水解糖的制備實驗3.3 糖蜜原料處理技術(shù)3.2 典型產(chǎn)品制備技術(shù)實驗3.4 紅霉素發(fā)酵實驗3.5 谷氨酸發(fā)酵實驗3.6 D-核糖發(fā)酵實驗3.7 發(fā)酵生產(chǎn)L-乳酸實驗3.8 酒精發(fā)酵實驗3.9 啤酒釀造實驗3.10 葡萄酒釀造實驗3.11 紅曲霉固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)紅曲紅色素實驗3.12 酸乳制作實驗3.13 秸稈厭氧發(fā)酵制備沼氣參考文獻(xiàn)第4章 酶工程技術(shù)實驗4.1 淀粉酶發(fā)酵制備實驗4.2 從雞蛋清中提取溶菌酶實驗4.3 多酚氧化酶提取及固定化實驗4.4 多酚氧化酶催化制備茶黃素參考文獻(xiàn)第5章 細(xì)胞工程技術(shù)實驗5.1 西洋參細(xì)胞懸浮培養(yǎng)實驗5.2 植物的組織培養(yǎng)實驗5.3 枯草芽孢桿菌原生質(zhì)體融合實驗5.4 小鼠骨骼肌細(xì)胞的培養(yǎng)參考文獻(xiàn)第6章 基因工程技術(shù)實驗6.1 PCR擴(kuò)增目的基因?qū)嶒?.2 重組載體構(gòu)建實驗6.3 感受態(tài)細(xì)胞的制備實驗6.4 細(xì)菌轉(zhuǎn)化與篩選實驗6.5 重組子篩選及PCR鑒定實驗6.6 重組質(zhì)粒酶切鑒定參考文獻(xiàn)第7章 生物產(chǎn)品分離純化7.1 細(xì)胞破碎技術(shù)概述實驗7.1 機(jī)械法(超聲波法)破碎酵母細(xì)胞及破碎率的測定實驗7.2 物理法(反復(fù)凍融法)破碎酵母細(xì)胞實驗7.3 酶溶法破碎大腸桿菌細(xì)胞7.2 發(fā)酵液的預(yù)處理概述實驗7.4 發(fā)酵液的絮凝實驗7.5 發(fā)酵液中金屬離子的去除實驗7.6 離心法分離酵母菌發(fā)酵液實驗7.7 板框壓濾機(jī)分離米曲霉發(fā)酵液實驗7.8 超濾膜分離枯草芽孢桿菌發(fā)酵液7.4 生物產(chǎn)品提取純化技術(shù)實驗7.9 鹽析實驗7.10 透析實驗7.11 離子交換實驗7.12 凝膠層析實驗7.13 淀粉酶的雙水相萃取實驗7.14 紅霉素的溶媒萃取實驗7.15 單萜類化合物的提取與檢測實驗7.16 人參總皂苷的提取與檢測實驗7.17 β-胡蘿卜素的提取與檢測7.5 結(jié)晶與重結(jié)晶技術(shù)實驗7.18 谷氨酸的結(jié)晶與重結(jié)晶7.6 生物產(chǎn)品濃縮與干燥技術(shù)實驗7.19 多糖的真空濃縮實驗7.20 多糖的冷凍干燥實驗7.21 生物產(chǎn)品的噴霧干燥參考文獻(xiàn)附錄一、常用培養(yǎng)基二、常用試劑的配制方法三、常用緩沖液的配制四、硫酸銨飽和度計算及加入方式五、生物工程單元操作實驗中常用數(shù)據(jù)表六、高壓蒸汽滅菌常用壓力、溫度與時間七、實驗室常用化學(xué)殺菌劑和消毒劑八、發(fā)酵中常用有機(jī)氮源的成分參考文獻(xiàn)

章節(jié)摘錄

第1章  實驗室與實驗的一般規(guī)則1.1  實驗室一般規(guī)則1.1.1  實驗室規(guī)則要點（1）每個同學(xué)都應(yīng)遵守學(xué)習(xí)紀(jì)律，維護(hù)實驗室秩序，保持室內(nèi)安靜，不大聲說笑或喧嘩。（2）實驗前認(rèn)真做好預(yù)習(xí)，明確目的和要求，了解本次實驗內(nèi)容的基本原理和操作步驟。（3）在實驗過程中聽從教師的指導(dǎo)，嚴(yán)肅認(rèn)真地按操作規(guī)程進(jìn)行實驗，并簡要、準(zhǔn)確地將實驗結(jié)果及原始數(shù)據(jù)記錄在專用的實驗記錄本上，養(yǎng)成良好的、實事求是的科學(xué)作風(fēng)。課后及時總結(jié)復(fù)習(xí)，根據(jù)原始記錄進(jìn)行整理，并寫出實驗報告，按時送交任課教師評閱。（4）保持實驗室環(huán)境和儀器的整潔是做好實驗的關(guān)鍵。必須維持實驗桌面及試劑藥品架上的清潔整齊，不要亂放和亂扔，儀器和試劑藥品放置要井然有序。公用試劑藥品用畢后立即蓋好放回原處，要特別注意保持藥品及試劑的純凈，嚴(yán)禁混雜。（5）使用儀器、藥品、試劑和各種器材都必須注意愛護(hù)及節(jié)約，不得浪費。洗滌和使用玻璃儀器時，應(yīng)謹(jǐn)慎仔細(xì)，防止損壞；在使用貴重精密儀器時，應(yīng)嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，發(fā)現(xiàn)故障立即報告教師，不要擅自動手拆散和檢修。（6）廢棄溶液可倒入水槽內(nèi)，但強(qiáng)酸、強(qiáng)堿溶液必須先用水稀釋后，再放水沖走。強(qiáng)腐蝕性廢棄試劑藥品、廢紙及其他固體廢物或帶有渣滓沉淀的廢液均應(yīng)倒入廢品缸內(nèi)，不能倒入水槽內(nèi)。（7）實驗室內(nèi)一切物品，未經(jīng)本室教師許可，嚴(yán)禁攜出室外，借物時必須辦理登記手續(xù)。儀器損壞時，應(yīng)隨即向教師報告，如實說明情況并認(rèn)真登記后方可補(bǔ)領(lǐng)。（8）必須遵守和熟悉實驗室安全規(guī)章及防護(hù)知識，不得違反和破壞。禁止在實驗室內(nèi)吸煙。使用電爐時應(yīng)有人在旁，不可擅自離開不管，用畢后切記斷電。（9）每次實驗結(jié)束后，應(yīng)各自將儀器清理放置（部分玻璃器皿需倒置安放），并整理好實驗桌面上的物品。值日生要負(fù)責(zé)當(dāng)日實驗室的衛(wèi)生和安全檢查，做好全部清理工作，離開實驗室前應(yīng)關(guān)上水、電、燃?xì)?、門窗等，嚴(yán)防安全隱患事故的發(fā)生。（10）對實驗內(nèi)容和安排不合理之處可提出改進(jìn)意見，做到教學(xué)相長。對實驗中出現(xiàn)的一切反常現(xiàn)象可開展分析和討論。（11）洗凈的儀器要放在架上或干凈的紗布上晾干，不能用抹布擦拭，更不能用抹布擦拭儀器內(nèi)壁。（12）挪動干凈玻璃儀器時，勿使手指接觸儀器內(nèi)部。（13）取出的試劑和標(biāo)準(zhǔn)溶液，如未用盡，切勿倒回原試劑瓶內(nèi)，以免摻混。（14）凡是發(fā)生煙霧、有毒氣體及有臭味氣體的實驗，必須在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行。（15）用實驗動物進(jìn)行實驗時，不許戲弄動物。進(jìn)行殺死或解剖等操作，應(yīng)按規(guī)定方法進(jìn)行，絕對不能用動物、手術(shù)器械或藥物開玩笑。（16）一般容量儀器的容積都是在20℃下校準(zhǔn)的。使用時如溫差在5℃以內(nèi)，容積改變不大，可以忽略不計。1.1.2  實驗室基本設(shè)施的使用1.1.2.1  生物工程實驗室的常規(guī)儀器、設(shè)備1.溫度控制系統(tǒng)（1）冰箱：根據(jù)藥品、試劑及多種生物制劑保存的需要，必須具備不同控溫級別的冰箱，最常使用的有4℃、-20℃、-80℃冰箱。4℃適合儲存某些溶液、試劑、藥品等。-20℃適合某些試劑、藥品、酶、血清、配好的抗生素、DNA和蛋白質(zhì)樣品等的保存。-80℃適合某些長期低溫保存的樣品、純化的樣品、特殊的低溫處理消化液等的保存。0～10℃的冷柜適合低溫條件下的電泳、層析、透析等實驗。（2）液氮罐：有些實驗材料、某些器官組織、細(xì)胞株、菌株及純化的樣品等，要求速凍和長期保存在超低溫環(huán)境下，就需要一個液氮罐（-196℃），其具有經(jīng)濟(jì)、省力和較好地保持細(xì)胞生物學(xué)特性的優(yōu)點。（3）培養(yǎng)箱：37℃恒溫箱用于細(xì)菌的固體培養(yǎng)和細(xì)胞培養(yǎng)。CO2培養(yǎng)箱適用于培養(yǎng)各種細(xì)胞，可恒定地提供一定量的CO2（通常5%），用來維持培養(yǎng)液的酸度（pH）。37℃恒溫空氣搖床可進(jìn)行液體細(xì)菌的培養(yǎng)。（4）水浴鍋：用于保溫。25～100℃水浴搖床可用于分子雜交實驗及各種生物化學(xué)酶反應(yīng)等實驗的保溫。25～100℃水浴箱用于常規(guī)實驗。（5）烘箱：主用于烘干實驗器皿，有些需要溫度高些，有些需要溫度低些。用于RNA方面的實驗用具，需要在250℃烘箱中烘干，有些塑料用具只能在42～45℃的烘箱中進(jìn)行烘干。2.水的凈化裝置隨著分子生物學(xué)的飛速發(fā)展，許多實驗對水純度的要求越來越高。常用的水的凈化裝置有以下幾種。（1）蒸餾水器：單蒸水常難以滿足實驗要求，可用雙蒸水、三蒸水配液。多次蒸餾水可除去水中非揮發(fā)性雜質(zhì)，不能完全除去水中溶解的氣體雜質(zhì)。（2）離子交換器：用離子交換法制取的水，稱為去離子水，其去離子效果好，但不能除去水中的非離子型雜質(zhì)，其中常含有微量的有機(jī)物（樹脂等）。（3）超純水：用蒸餾水、離子交換水、反滲透純水作為供水，用磁鐵耦合齒輪泵作用使水循環(huán)。超純水用于PCR、氨基酸分析、DNA測序、酶反應(yīng)、組織和細(xì)胞培養(yǎng)等。3.菌消毒設(shè)備（1）蒸汽消毒鍋：用于小批量物品的隨時消毒。大批實驗物品、試劑、培養(yǎng)基可使用大型消毒器定時進(jìn)行消毒。（2）紫外線、75%乙醇、0.1%SDS（消毒劑）。一些不耐高壓、高溫消毒的用具可用紫外線照射，或用乙醇和SDS浸泡。紫外線照射使用方便，但滅菌效果與距離有關(guān)，且產(chǎn)生臭氧污染，常用于無菌室、超凈臺和塑料用具的消毒。（3）濾器濾膜：不耐高溫、高壓的試劑用其除菌。（4）煮沸消毒：主要用于金屬器械的消毒和急需時采用。4.計量系統(tǒng)（1）稱量系統(tǒng)：（各種天平）臺秤、托盤天平、鈕力擺動天平、光電分子天平、精密電子分析天平。（2）液體體積的度量。精量器：移液管、微量取液器。粗量器：刻度試管、燒杯、錐形瓶、量筒。（3）pH測量。pH計：測定溶液中H+ 的直接電位的儀器，主要通過一對電極，在不同的pH溶液中產(chǎn)生不同的電動勢，用pH表示出來。pH試紙：只適用于培養(yǎng)液、酚飽和液、緩沖液或其他試劑溶液pH的粗略估計；而大部分試劑配制嚴(yán)格要求pH，需精確度高（小數(shù)點后兩位）的pH計。（4）OD值測量：光密度計、分光光度計是利用物質(zhì)在可見光和紫外線區(qū)域中的吸收光譜來鑒定該物質(zhì)的性質(zhì)及含量的一種儀器。它由光源、單色器、吸收池、接收器、測量儀表或顯示屏幕所組成。OD值是許多溶液中溶質(zhì)定量的方便指標(biāo)之一，通過所產(chǎn)生的單色光來測定某一溶液對該單色光的吸收值，利用它可進(jìn)行核酸溶液定量和純度的初步判斷。5.離心機(jī)離心技術(shù)是研究生物結(jié)構(gòu)和功能不可缺少的一種物理技術(shù)手段。因為各種物質(zhì)在沉淀系數(shù)、浮力和質(zhì)量等方面有差異，可利用強(qiáng)大的離心力場，使其分離、純化和濃縮。目前有各種各樣的離心機(jī)，可供少于0.05mL到幾升的樣品離心之用。離心技術(shù)應(yīng)用廣泛，包括收集和分離細(xì)胞、細(xì)胞器和生物大分子等。據(jù)其轉(zhuǎn)速的不同，離心機(jī)可分為以下幾種類型。（1）常速離心機(jī)：最大轉(zhuǎn)速8000r/min，最大離心力10000g。醫(yī)用或臺式離心機(jī)：是離心機(jī)中最簡單而廉價的，最常用于收集快速沉降系數(shù)的物質(zhì)，如紅細(xì)胞、粗大的沉淀物、酵母菌和細(xì)菌等。低速冷凍離心機(jī)：主要用于細(xì)胞、細(xì)胞核、細(xì)胞膜及細(xì)菌的沉淀和收集等。（2）高速離心機(jī)：最大轉(zhuǎn)速25000r/min，最大離心力100000g。有冷凍和常溫兩種，多用于制備和收集微生物、細(xì)胞碎片、細(xì)胞、大的細(xì)胞器、硫酸銨沉淀物及免疫沉淀物等。（3）超速離心機(jī)：最大轉(zhuǎn)速120000r/min，最大離心力500000g。主要用于DNA、RNA、蛋白質(zhì)等生物大分子以及細(xì)胞器、病毒等的分離純化；樣品純度檢測；沉降系數(shù)和相對分子質(zhì)量的測定等。6.超凈工作臺內(nèi)有紫外燈、照明燈，還應(yīng)有酒精燈火焰、75%乙醇等滅菌的設(shè)備，是一種提供局部潔凈度的設(shè)備。其原理是鼓風(fēng)機(jī)驅(qū)動空氣，經(jīng)過低、中效的過濾器后，通過工作臺面，使實驗操作區(qū)域成為無菌的環(huán)境。超凈臺按氣流方向的不同大致分為如下幾種類型。（1）側(cè)流式：凈化后，氣流從左側(cè)或右側(cè)通過工作臺面流向?qū)?cè)，或者從上往下或從下往上流向?qū)?cè)，它們都能形成氣流屏障而保障臺面無菌。缺點：在凈化氣流和外面氣體交界處，可由氣體的流向而出現(xiàn)負(fù)壓，使少量的未凈化氣體混入，而造成污染。（2）外流式：氣流面向操作人員的方向流動，從而保證外面氣體不能混入。缺點：在進(jìn)行有害物質(zhì)實驗時，對操作人員不利，但可采用有機(jī)玻璃把上半部分遮擋起來，使氣流從下方流出。7.電泳系統(tǒng)電泳技術(shù)用于檢測、鑒定各種生物大分子的純度、含量及描述它們的特征，甚至還是分離、純化、回收和濃縮樣品的技術(shù)之一。核酸和蛋白質(zhì)等都帶有電荷，當(dāng)它們被置于電場中時，能夠移動。電泳裝置由兩部分組成：電源裝置和電泳槽裝置。（1）電源裝置：電源需通過穩(wěn)壓器穩(wěn)流，既能提供穩(wěn)定的直流電，又能輸出穩(wěn)定的電壓，可用于三種電泳儀。常度穩(wěn)壓電泳儀：輸出電壓0～500V，0～15mA；中度穩(wěn)壓電泳儀：輸出電壓400～1000V；高度穩(wěn)壓電泳儀：輸出電壓1000V以上的電源裝置。（2）電泳槽裝置：可分為以下兩種。水平式電泳槽：一般分為微型電泳槽和大號水平式電泳槽；垂直式電泳槽：分垂直平板電泳槽和圓柱形電泳槽裝置。8.PCR儀PCR（polymerasechainreaction）儀也稱DNA熱循環(huán)儀、基因擴(kuò)增儀，它使一對寡核。苷酸引物結(jié)合到正負(fù)DNA鏈上的靶序列兩側(cè)，從而酶促合成拷貝數(shù)百萬倍的靶序列DNA片段。它的每一循環(huán)包括在三種不同溫度下進(jìn)行的DNA變性、引物復(fù)性、DNA聚合酶催化的延伸反應(yīng)三個過程。9.凝膠成像分析系統(tǒng)對電泳后含溴化乙錠（EB）核酸樣品的觀察分析。10.干燥設(shè)備（1）真空加熱干燥箱：適用于熱敏性、易分解、易氧化和復(fù)雜成分物料的快速干燥。（2）電泳凝膠干燥箱：對電泳后的凝膠進(jìn)行脫水干燥的儀器，一般可將凝膠干燥到一些玻璃紙上，干燥后的凝膠易于保存。（3）液氮冷凍干燥：適用于活性蛋白質(zhì)樣品的干燥與結(jié)晶。（4）真空泵：許多實驗都需要抽真空，如乙醇沉淀后核酸樣品的干燥、電泳凝膠的干燥等。11.其他（1）微波爐：便于一些溶液的快速加熱和定溫加熱，電泳瓊脂糖凝膠配制、溶化等。（2）制冰機(jī)：用于制造大多數(shù)核酸、蛋白質(zhì)的實驗操作所需的低溫環(huán)境，以減少核酸酶或蛋白酶的水解。（3）層析裝置：（色譜分離）是一種分離多組分混合物的有效物理方法。（4）磁力攪拌器：多角度旋轉(zhuǎn)混勻器、快速振蕩混合器，用于混合液體和液固樣品的儀器。（5）組織勻漿器：超聲組織及細(xì)胞破碎器，用其進(jìn)行樣品的分離提純實驗。（6）通風(fēng)櫥：很多溶劑能逸出毒氣，故必備通風(fēng)裝置，放射性實驗還要有有機(jī)玻璃屏蔽。（7）玻璃蒸餾器、電熱加帽、變壓器：用于酚等有機(jī)溶劑的蒸餾。（8）真空印記系統(tǒng)、DNA合成/測序儀：這些都是對核酸進(jìn)行深入研究的必備儀器。（9）吸頭、Eppendorf管（EP管）：微管移液器吸頭（吸液尖）、EP管（微量離心管）可洗滌，用硅化消毒后可反復(fù)使用。對一些要求嚴(yán)格的實驗，如RNA的提取、保存等操作，應(yīng)使用新的消毒吸頭與EP管。另外還應(yīng)備有常用規(guī)格的離心管（1000mL、500mL、250mL、50mL、7mL等）及96孔、24孔、12孔、6孔的細(xì)胞培養(yǎng)塑料平板等。（10）小型設(shè)備、用具：定時器、濾膜、保鮮膜、防護(hù)眼鏡、鴨嘴鑷、常規(guī)的玻璃或塑料器皿（包括平皿、試管、燒杯、量瓶、試劑分液漏斗，避光保存的試劑應(yīng)使用棕色試劑瓶，如飽和酚、巰基乙醇等）、記號筆、各種手套（PE、乳膠、家用、防酸的等）。1.1.2.2  部分設(shè)備的使用方法1.恒溫空氣搖床的使用（1）將樣品瓶牢固放入彈簧夾中；（2）接通電源開關(guān)，儀器進(jìn)入準(zhǔn)備狀態(tài)；（3）參數(shù)設(shè)定（設(shè)定溫度、時間、轉(zhuǎn)速等參數(shù)）；（4）按啟動鍵儀器開始工作，按暫停鍵可暫停托盤的旋轉(zhuǎn)；（5）按電源鍵，顯示屏顯示消失，關(guān)閉電源總開關(guān)。2.超凈工作臺的使用（1）使用工作臺時，先用經(jīng)清潔液浸泡的紗布擦拭臺面，然后用消毒劑擦拭消毒。（2）接通電源，提前30min打開紫外燈照射消毒，處理凈化工作區(qū)內(nèi)工作臺表面積累的微生物，15min后，關(guān)閉紫外燈，開啟鼓風(fēng)機(jī)。（3）工作臺面上，不要存放不必要的物品，以保持工作區(qū)內(nèi)的潔凈氣流不受干擾。（4）操作結(jié)束后，清理工作臺面，收集各廢棄物，關(guān)閉風(fēng)機(jī)及照明開關(guān)，用清潔劑及消毒劑擦拭消毒。（5）最后開啟工作臺紫外燈，照射消毒30min后，關(guān)閉紫外燈，切斷電源。3.低溫臺式高速離心機(jī)的使用（1）把離心機(jī)置于平面桌或平面臺上，目測使之平衡，用手輕搖一下離心機(jī)，檢查離心機(jī)是否放置平衡。（2）打開門蓋，將離心管放入轉(zhuǎn)子內(nèi)，離心管必須成偶數(shù)對稱放入，且要事先平衡，完畢用手輕輕旋轉(zhuǎn)一下轉(zhuǎn)子體，使離心管架運轉(zhuǎn)靈活。（3）關(guān)上門蓋，注意一定要使門蓋鎖緊，完畢后用手檢查門蓋是否關(guān)緊。（4）插上電源插座，按下電源開關(guān)（電源開關(guān)在離心機(jī)背面、電源座上方）。（5）設(shè)置轉(zhuǎn)子號、轉(zhuǎn)速、時間：在停止?fàn)顟B(tài)下，用戶可以設(shè)置轉(zhuǎn)子號、轉(zhuǎn)速、時間，此時離心機(jī)處于設(shè)置狀態(tài)，停止燈亮、運行燈閃爍；按下啟動鍵離心開始（常用，最高轉(zhuǎn)速為13000r/min，時間最長為20min）。注意：對應(yīng)的轉(zhuǎn)子一定要設(shè)置在相應(yīng)的轉(zhuǎn)速范圍內(nèi)，不可超速使用，否則對試管或轉(zhuǎn)子有損壞。（6）離心機(jī)時間倒計時到“0”時，離心機(jī)將自動停止，當(dāng)轉(zhuǎn)子停轉(zhuǎn)后，打開門蓋取出離心管，關(guān)閉電源開關(guān)。4.微量移液器的使用（1）將微量移液器裝上吸頭（不同規(guī)格的移液器用不同的吸頭）。（2）將微量移液器按鈕輕輕壓至第一停點。（3）垂直握持微量移液器，使吸嘴浸入液面下幾毫米，千萬不要將吸嘴直接插到液體底部。（4）緩慢、平穩(wěn)地松開控制按鈕，吸上樣液；否則液體進(jìn)入吸嘴太快，會導(dǎo)致液體倒吸入移液器內(nèi)部，或吸入體積減小。（5）1s后將吸嘴提離液面。（6）平穩(wěn)地把按鈕壓到第一停點，再把按鈕壓至第二停點以排出剩余液體。（7）提起微量移液器，然后按吸頭彈射器除去吸頭。5.PCR的使用（1）開機(jī)：打開開關(guān)，視窗上顯示“SELFTEST”。（2）放入樣品管，關(guān)緊蓋子。（3）如果要運行已經(jīng)編好的程序，則直接按“Proceed”，用【箭頭】鍵選擇已儲存的程序，按“Proceed”，則開始執(zhí)行程序。（4）如果要輸入新的程序，則在RUN-ENTER菜單上用箭頭鍵選擇ENTERPRO-GRAM，按“Proceed”：①命名新的程序，最多8個字母，輸入后按“Proceed”確認(rèn)（如輸入字母、數(shù)字）；②輸入程序步驟：輸入名字后，確認(rèn)，然后輸入相關(guān)程序。（5）輸入完成的程序后，到RUN-ENTER菜單，選擇新程序，開始運行。（6）其他：用“Pause”可以暫停一個運行的程序，再按一次繼續(xù)程序；用“Stop”或“Cancel”可停止運行的程序。6.電泳儀的使用（1）首先用導(dǎo)線將電泳槽的兩個電極與電泳儀的直流輸出端連接，注意極性不要接反。（2）按電源開關(guān)，顯示屏出現(xiàn)“歡迎使用DYY-12型電腦三恒多用電泳儀..”等字樣后，同時系統(tǒng)初始化，蜂鳴4聲，設(shè)置常設(shè)值。屏幕轉(zhuǎn)成參數(shù)設(shè)置狀態(tài)，根據(jù)工作需要選擇穩(wěn)壓穩(wěn)流方式及電壓電流范圍。（3）確認(rèn)各參數(shù)無誤后，按【啟動】鍵，啟動電泳儀輸出程序。在顯示屏狀態(tài)欄中顯示“Start”，并蜂鳴4聲，提醒操作者電泳儀將輸出高電壓，注意安全。之后逐漸將輸出電壓加至設(shè)置值，同時在狀態(tài)欄中顯示“Run”，并有兩個不斷閃爍的高壓符號，表示端口已有電壓輸出。在狀態(tài)欄最下方，顯示實際的工作時間（精確到秒）。（4）電泳結(jié)束，儀器顯示“END”，并連續(xù)蜂鳴提醒。此時按任一鍵可止鳴。7.高壓滅菌鍋（1）開蓋：轉(zhuǎn)動手輪，使鍋蓋離開密封圈，添加蒸餾水至剛沒于板上。（2）通電：將控制面板上電源開關(guān)按至“ON”處，若水位低（LOW）則紅燈亮。（3）堆放物品：需包扎的滅菌物品，體積以不超過200mm×100mm×100mm為宜，各包裝之間留有間隙，堆放在金屬框內(nèi)，這樣有利于蒸汽的穿透，提高滅菌效果。滅菌時間為121℃，20min；如為液體，液體必須裝在可耐高溫的玻璃器皿中，且不可裝滿，2/3即可，121℃，18～20min。（4）密封高壓鍋：推橫梁入立柱內(nèi)，旋轉(zhuǎn)手輪，使鍋蓋下壓，充分壓緊。（5）設(shè)定時間和溫度，開始滅菌。……

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