細胞生物技術(shù)實驗指南

前言

伴隨符細胞生物學、分子生物學、免疫學、遺傳學等學科的迅猛發(fā)展，以及計算機、網(wǎng)絡(luò)信息等島新技術(shù)的普遍應(yīng)用，生命科學研究的進展突飛猛進。作為生命科學主要分支的細胞工程及生物技術(shù)·將為解決人類面臨的重大問題，如糧食、健康、環(huán)境、能源等方而存的問題，提供一個瀅有力的工具，因而具有廣闊的發(fā)展前景，被認為是21世紀科學T程技術(shù)重要的核心之一。目前，細胞工程及生物技術(shù)最活躍的應(yīng)用領(lǐng)域是生物醫(yī)藥行業(yè)，世界各國均把生物醫(yī)藥行業(yè)視為最具潛力的戰(zhàn)略產(chǎn)業(yè)，紛紛投入巨額資金，進行相戈產(chǎn)船與技術(shù)的開發(fā)，井匕逐步形成一個巨大的高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)，產(chǎn)生了巨大的社會效益和經(jīng)濟效益。從本質(zhì)上講，生物技術(shù)的突破引發(fā)r細胞學研究乃至生命科學及醫(yī)學革命，日新月異的生物技術(shù)的誕生有力地推動著這一高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)的飛速發(fā)展?？寺⊙颉岸嗬颉钡呐嘤晒Γ瑢⒅委熜钥寺⊙芯客葡蛞粋€新高潮，為糖尿病、脊椎損傷和先天性免疫缺乏癥等現(xiàn)代醫(yī)學難以根治的疾病的解決帶來了新的希螺；干細胞研究的重大進展，使得人類在實驗室中實現(xiàn)培育人造器官的夢想不冉遙遠。這些激動人心的科學實驗都足技術(shù)推動科學進步的最好證明。一個新學科、新領(lǐng)域的誕生、發(fā)展以至于完善有賴于實驗技術(shù)方法的創(chuàng)新與升華，如果沒有先進成熟的技術(shù)，沒有認真規(guī)范的操作，沒有嚴格標準的判斷依據(jù)，沒有重復性好的實驗方法，就難以獲得可靠的實驗數(shù)據(jù)和結(jié)果+也就無法得出令人信服的結(jié)論，對人類社會和經(jīng)濟發(fā)展做出貢獻電就無從談起。

內(nèi)容概要

本書著重精選細胞工程和生物技術(shù)領(lǐng)域常用的技術(shù)方法和實驗方案，以實用性強、重復性好為基準，并兼顧實驗技術(shù)手段的先進性；以可操作規(guī)范化為目的，理論聯(lián)系實際，盡可能收集整理目前國際通行的先進技術(shù)方法，并對該領(lǐng)域的具有重大意義的新技術(shù)作了簡明扼要、深入淺出的推薦。    本書不僅介紹常規(guī)細胞培養(yǎng)技術(shù)和問題解決指南，同時提供特殊細胞(如干細胞和神經(jīng)細胞等)的分離、純化和培養(yǎng)手段；既保留細胞實驗指南類叢書的實用性特點，又兼顧生物技術(shù)高速發(fā)展和迅速更新的要求，有目的地引入基因和蛋白芯片檢測、RNA干擾、基因治療病毒載體、細胞核移植、干細胞等前沿技術(shù)。    每一種主要的技術(shù)方法均從基本原理入手，以儀器設(shè)備和試劑、操作方法與結(jié)果分析、實驗技巧及注意事項等為重點逐一闡述，以期為從事細胞工程、生物技術(shù)、醫(yī)藥衛(wèi)生、農(nóng)業(yè)、食品等生命科學等領(lǐng)域的研究人員、技術(shù)操作人員以及大中專高校師生，提供一本前瞻性、重復性、可操作性兼?zhèn)涞膶嶒灱夹g(shù)指南。    本書適用于上述相關(guān)行業(yè)的人員在實驗中和課題設(shè)計時參考。

作者簡介

刁勇，博士，原籍山東鄆城，教育部分子藥物工程研究中心總工程師，華僑大學分子藥物學研究所副所長、教授、博士生導師。第二軍醫(yī)大學藥學學士，南京市有突出貢獻的中青年專家。主要從事新藥研究與開發(fā)，以及化學藥、中藥和生物制品等藥品的生產(chǎn)與管理。曾獲得國這０有科技進

書籍目錄

第一章　細胞與生物技術(shù)基礎(chǔ)　第一節(jié)　細胞生物學　　一、細胞生物學研究內(nèi)容與現(xiàn)狀　　二、細胞生物學發(fā)展史　　三、細胞生物學技術(shù)　第二節(jié)　細胞分子生物學　　一、細胞分子生物學的發(fā)展　　二、細胞分子生物學技術(shù)　第三節(jié)　細胞工程　　一、基本概念　　二、細胞工程的發(fā)展進程　　三、細胞工程技術(shù)　　四、展望第二章　細胞顯微觀測技術(shù)　第一節(jié)　細胞顯微技術(shù)　　一、光學顯微鏡　　二、電子顯微鏡　　三、掃描探針顯微鏡　第二節(jié)　細胞超微標記示蹤技術(shù)　　一、電鏡細胞化學　　二、免疫電鏡技術(shù)　　三、電鏡原位雜交技術(shù)第三章　細胞檢測技術(shù)　第一節(jié)　流式細胞儀檢測技術(shù)　　一、流式細胞儀的工作原理和基本操作　　二、流式細胞術(shù)樣品制備技術(shù)　　三、細胞免疫熒光染色技術(shù)　　四、細胞分選技求　第二節(jié)　細胞化學和免疫細胞化學　　一、細胞化學　　二、免疫細胞化學　第三節(jié)　細胞增殖與凋亡　　一、細胞增殖　　二、細胞凋亡   第四章　細胞的培養(yǎng)與分離技術(shù)  第一節(jié)　細胞培養(yǎng)基本方法和技術(shù)    一、細胞的原代培養(yǎng)    二、細胞的傳代培養(yǎng)    三、細胞的凍存與復蘇    四、細胞計數(shù)與成活率檢測    五、培養(yǎng)物污染的判斷及防止　第二節(jié)　幾種特殊細胞的培養(yǎng)與分離    一、神經(jīng)元細胞的培養(yǎng)與分離    二、肝細胞的培養(yǎng)與分離    三、星狀細胞的培養(yǎng)與分離    四、上皮細胞的培養(yǎng)與分離    五、內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)與分離    六、腫瘤細胞的培養(yǎng)與分離第五章　細胞器的分離與制備技術(shù)　第一節(jié)　細胞膜    一、從懸浮細胞中制備細胞膜    二、從組織培養(yǎng)皿中的匯合或部分匯合細胞中分離頂層膜、基底膜或中間膜    三、從生長于微載體上的細胞中分離細胞膜　第二節(jié)　橋粒    一、從牛舌或?？诒遣糠蛛x橋粒    二、分級分離橋?！〉谌?jié)　細胞質(zhì)　    一、網(wǎng)織紅細胞和紅細胞胞質(zhì)液的制備    二、用培養(yǎng)細胞制備胞質(zhì)液　第四節(jié)　線粒體  　一、從肝臟中分離線粒體　  二、從組織培養(yǎng)細胞中分離線粒體　第五節(jié)　高爾基體    一、從大鼠肝臟中分離高爾基復合體    二、從培養(yǎng)的哺乳動物細胞中分離高爾基體　第六節(jié)　粗微體  　一、從狗的胰臟中制備粗微體  　二、從組織培養(yǎng)細胞中制備粗微體　第七節(jié)　核糖體　第八節(jié)　細胞核  　一、從肝臟組織中制備細胞核  　  二、用滲透速溶脹法從HeLa細胞懸浮培養(yǎng)物中制備細胞核　  三、活化劑裂解方法從懸浮培養(yǎng)的HeLa細胞中制備細胞核　……第六章　細胞的誘導分化技術(shù)第七章　干細胞分享與培養(yǎng)技術(shù)第八章　細胞內(nèi)基因的導入第九章　哺乳動物細胞RNAi技術(shù)第十章　細胞內(nèi)基因的檢測第十一章　染色體檢測技術(shù)第十二章　細胞信號通路的檢測方法第十三章　細胞與重組病毒載體的生產(chǎn)第十四章　細胞融合與單克隆抗體第十五章　治療性克隆技術(shù)第十六章　細胞生物技術(shù)的應(yīng)用參考文獻

章節(jié)摘錄

第一章 細胞與生物技術(shù)基礎(chǔ)王 曉  施偉杰  許瑞安第一節(jié)細胞生物學一、細胞生物學研究內(nèi)容與現(xiàn)狀1．細胞及細胞生物學細胞是生物體形態(tài)結(jié)構(gòu)和生命活動的基本單位。細胞的重大生命活動如增艮、分化、衰老和凋亡是生命體賴以存在的基礎(chǔ)，也是研究與控制動植物生艮、發(fā)育、人類疾病（尤其是腫瘤）發(fā)生以及衰老的產(chǎn)生與延緩等過程的基礎(chǔ)。細胞學是研究細胞的結(jié)構(gòu)、形態(tài)、生理功能及生活史的科學。現(xiàn)代細胞學是隨著細胞體外培養(yǎng)的實施及包括分子生物學技術(shù)在內(nèi)的物理、化學等方面技術(shù)的完善，推動了生物學在細胞、分子水平上的研究日益成為學科研究的主要方向，因而誕生了細胞生物學這一生命科學領(lǐng)域中最活躍、最富有發(fā)展前景的分支科學。細胞生物學是研究細胞的結(jié)構(gòu)、功能、生活史以及細胞生命活動的科學，它在不同層次上以研究細胞結(jié)構(gòu)與功能、增殖、分化、衰老與凋亡、信號傳遞、基因表達與調(diào)控、起源與進化等為主要內(nèi)容，是生命科學和分子生物學研究的基礎(chǔ)，是一門蓬勃發(fā)展的新興學科，它的研究內(nèi)容和范疇義與生命科學的其他學科相互交匯、相互滲透。2．細胞生物學研究對象和任務(wù)細胞生物學以細胞為研究對象，進而揭示其生物科學的本質(zhì)。其研究的任務(wù)是多方面的，應(yīng)采取分析與綜合相結(jié)合的方法，從細胞整體、亞顯微結(jié)構(gòu)以及分子三個不同的層次將細胞的結(jié)構(gòu)與功能有機結(jié)合并進行探討。研究理論問題與解決實際問題斤舉。運用現(xiàn)代新工具、新技術(shù)、新方法揭示細胞內(nèi)的亞顯微與分子結(jié)構(gòu)，以及細胞生命活動的變化規(guī)律、內(nèi)在聯(lián)系及其功能與應(yīng)用。

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《細胞生物技術(shù)實驗指南》由化學工業(yè)出版社出版。

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