昆蟲細(xì)胞生物技術(shù)

內(nèi)容概要

　　本書內(nèi)容包括昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)、昆蟲細(xì)胞系的生理與發(fā)育能力、昆蟲神經(jīng)細(xì)胞的離體培養(yǎng)及其應(yīng)用、離體昆蟲細(xì)胞對(duì)脅迫因子的抗性、桿狀病毒表達(dá)載體介導(dǎo)外源基因在昆蟲細(xì)胞中的表達(dá)、從昆蟲細(xì)胞誘導(dǎo)抗菌肽、昆蟲細(xì)胞在病毒研究中的應(yīng)用、昆蟲細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)及其應(yīng)用、昆蟲細(xì)胞在蘇云金桿菌毒素研究中的應(yīng)用等。
　　本書可供生物學(xué)專業(yè)、農(nóng)林院校植物保護(hù)專業(yè)的教師、研究生和相關(guān)研究人員閱讀與參考。

書籍目錄

1  昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)
  1.1  昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)知識(shí)
    1.1.1  細(xì)胞培養(yǎng)的一些基本概念
    1.1.2  細(xì)胞的形態(tài)
    1.1.3  細(xì)胞生長和增殖過程及其特點(diǎn)
  1.2  昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)基與平衡鹽溶液
    1.2.1  平衡鹽溶液
    1.2.2  培養(yǎng)基
  1.3  昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)基本技術(shù)
    1.3.1  基本操作技術(shù)
    1.3.2  原代培養(yǎng)
    1.3.3  傳代培養(yǎng)
    1.3.4  細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇
    1.3.5  影響昆蟲細(xì)胞增殖的環(huán)境因素
  1.4  昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)常規(guī)研究方法
    1.4.1  細(xì)胞形態(tài)觀察
    1.4.2  細(xì)胞生長的動(dòng)力學(xué)研究
    1.4.3  細(xì)胞活力測(cè)定
    1.4.4  細(xì)胞的克隆
    1.4.5  細(xì)胞染色體分析
    1.4.6  細(xì)胞的同工酶測(cè)定
    1.4.7  DNA分子標(biāo)記技術(shù)
  1.5  常用的昆蟲細(xì)胞系及其特性
    1.5.1  昆蟲細(xì)胞系的命名
    1.5.2  常用的昆蟲細(xì)胞系及其特性
    1.5.3  我國建立的昆蟲細(xì)胞系
  主要參考文獻(xiàn)
2  昆蟲細(xì)胞系的生理與發(fā)育能力
  2.1  細(xì)胞的內(nèi)分泌
    2.1.1  蛻皮甾類激素的合成和代謝
    2.1.2  蛻皮甾類激素的作用
  2.2  形態(tài)發(fā)生
    2.2.1  形態(tài)的調(diào)節(jié)
    2.2.2  發(fā)育因子來源的細(xì)胞系
  主要參考文獻(xiàn)
3  昆蟲神經(jīng)細(xì)胞的離體培養(yǎng)及其應(yīng)用
  3.1  昆蟲神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)
    3.1.1  昆蟲神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)方法
    3.1.2  離體培養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞的類型和細(xì)胞形態(tài)
  3.2  神經(jīng)細(xì)胞的生理學(xué)
    3.2.1  昆蟲器官培養(yǎng)——腦與神經(jīng)分泌
    3.2.2  離子通道與離子電流
  3.3  神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育生物學(xué)
    3.3.1  神經(jīng)的發(fā)生與分化
    3.3.2  神經(jīng)遞質(zhì)表型的發(fā)育
    3.3.3  突觸的發(fā)生
    3.3.4  軸突生長
    3.3.5  神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng)與作用
  3.4  神經(jīng)細(xì)胞受體的藥理學(xué)
  3.5  神經(jīng)細(xì)胞與靶細(xì)胞的共培養(yǎng)及其相互作用
  主要參考文獻(xiàn)
4  離體昆蟲細(xì)胞對(duì)脅迫因子的抗性
  4.1  昆蟲細(xì)胞對(duì)X射線和γ射線的抗性
    4.1.1  昆蟲細(xì)胞的相對(duì)抗性
    4.1.2  DNA的修復(fù)
    4.1.3  細(xì)胞的恢復(fù)及其過程
  4.2  昆蟲細(xì)胞對(duì)紫外線的抗性
    4.2.1  昆蟲細(xì)胞的相對(duì)抗性
    4.2.2  DNA的修復(fù)
    4.2.3  細(xì)胞的恢復(fù)及其過程
  4.3  昆蟲細(xì)胞對(duì)化學(xué)因子的抗性
    4.3.1  昆蟲細(xì)胞的相對(duì)抗性
    4.3.2  DNA的修復(fù)
    4.3.3  細(xì)胞的恢復(fù)及其過程
  4.4  昆蟲細(xì)胞對(duì)熱的抗性
    4.4.1  昆蟲細(xì)胞的相對(duì)抗性
    4.4.2  細(xì)胞恢復(fù)過程
    4.4.3  分子恢復(fù)過程
  4.5  脅迫敏感突變體細(xì)胞
    4.5.1  突變體細(xì)胞的分離
    4.5.2  脅迫敏感突變體細(xì)胞的特性
  主要參考文獻(xiàn)
5  桿狀病毒表達(dá)載體介導(dǎo)外源基因在昆蟲細(xì)胞中的表達(dá)
  5.1  桿狀病毒及其基因組
    5.1.1  桿狀病毒的分類及其生物學(xué)特征
    5.1.2  桿狀病毒的基因組及基因
    5.1.3  桿狀病毒基因表達(dá)
  5.2  桿狀病毒表達(dá)載體系統(tǒng)
    5.2.1  桿狀病毒表達(dá)栽體的特性
    5.2.2  重組桿狀病毒的構(gòu)建原理
    5.2.3  轉(zhuǎn)移栽體
    5.2.4  插入重組桿狀病毒中的外源基因
    5.2.5  用于驅(qū)動(dòng)外源基因表達(dá)的啟動(dòng)子
  5.3  重組桿狀病毒的構(gòu)建方法
    5.3.1  轉(zhuǎn)移栽體的構(gòu)建
    5.3.2  轉(zhuǎn)移栽體與病毒共轉(zhuǎn)染
    5.3.3  重組病毒的分離、篩選與鑒定
  5.4  桿狀病毒表達(dá)載體的應(yīng)用
    5.4.1  外源蛋白的高效表達(dá)
    5.4.2  基于桿狀病毒表達(dá)栽體的重組病毒殺蟲劑
    5.4.3  基于桿狀病毒載體的基因治療
  主要參考文獻(xiàn)
6  從昆蟲細(xì)胞誘導(dǎo)抗菌肽
  6.1  抗菌肽及其類型
    6.1.1  天蠶素類
    6.1.2  昆蟲防御素
    6.1.3  富含脯氨酸的抗茵肽
    6.1.4  富含甘氨酸的抗茵肽
  6.2  抗菌肽的功能及作用方式
    6.2.1  抗菌肽的功能
    6.2.2  抗菌肽作用機(jī)制
  6.3  抗菌肽的基因及其表達(dá)
    6.3.1  抗菌肽的基因和基因組織
    6.3.2  抗菌肽基因的表達(dá)與調(diào)控
  6.4  利用昆蟲離體細(xì)胞誘導(dǎo)抗菌肽
    6.4.1  昆蟲細(xì)胞與表達(dá)抗茵肽
    6.4.2  昆蟲細(xì)胞抗茵肽誘導(dǎo)和分離
  主要參考文獻(xiàn)
7  昆蟲細(xì)胞在病毒研究中的應(yīng)用
  7.1  昆蟲細(xì)胞對(duì)病毒的敏感性
  7.2  病毒的離體復(fù)制
    7.2.1  核型多角體病毒的離體復(fù)制
    7.2.2  顆粒體病毒的離體復(fù)制
    7.2.3  質(zhì)型多角體病毒的離體復(fù)制
    7.2.4  其他病毒的離體復(fù)制
  7.3  病毒基因的表達(dá)與調(diào)控
    7.3.1  桿狀病毒基因的表達(dá)
    7.3.2  桿狀病毒基因表達(dá)的細(xì)胞因子
  7.4  病毒與宿主細(xì)胞的相互關(guān)系研究
    7.4.1  病毒誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡
    7.4.2  病毒復(fù)制與細(xì)胞周期
    7.4.3  病毒復(fù)制與細(xì)胞骨架
  主要參考文獻(xiàn)
8  昆蟲細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)及其應(yīng)用
  8.1  昆蟲細(xì)胞和表達(dá)載體的選擇
  8.2  昆蟲細(xì)胞代謝
  8.3  昆蟲細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)方法與大規(guī)模培養(yǎng)
    8.3.1  滾瓶培養(yǎng)
    8.3.2  昆蟲細(xì)胞的微栽體及其他固定化培養(yǎng)
    8.3.3  轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)
    8.3.4  搖瓶培養(yǎng)
    8.3.5  生物反應(yīng)器培養(yǎng)
    8.3.6  影響昆蟲細(xì)胞增殖的理化因素
  8.4  昆蟲細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)的應(yīng)用
    8.4.1  外源蛋白的生產(chǎn)
    8.4.2  病毒的生產(chǎn)
  主要參考文獻(xiàn)
9  昆蟲細(xì)胞在蘇云金桿菌毒素研究中的應(yīng)用
  9.1  蘇云金桿菌毒素
    9.1.1  蘇云金桿菌毒素及其性質(zhì)
    9.1.2  昆蟲細(xì)胞對(duì)蘇云金桿菌毒素的敏感性
  9.2  蘇云金桿菌毒素的細(xì)胞病理研究
    9.2.1  鱗翅目昆蟲細(xì)胞
    9.2.2  雙翅目昆蟲細(xì)胞
  9.3  蘇云金桿菌毒素作用機(jī)制
  9.4  利用昆蟲細(xì)胞研究蘇云金桿菌抗性
    9.4.1  昆蟲對(duì)蘇云金桿菌的抗性
    9.4.2  抗性細(xì)胞的建立和篩選
    9.4.3  抗性成因和機(jī)制
  9.5  基于昆蟲細(xì)胞的蘇云金桿菌毒素測(cè)定技術(shù)
    9.5.1  草坪測(cè)定
    9.5.2  Bt殺蟲劑的離體細(xì)胞生物測(cè)定
  主要參考文獻(xiàn)

章節(jié)摘錄

　　1.4.4 細(xì)胞的克隆　　無論取自昆蟲的何種組織建立的細(xì)胞系，早期細(xì)胞培養(yǎng)物中細(xì)胞的類型、細(xì)胞生物學(xué)特性、細(xì)胞的遺傳標(biāo)志是多樣的。比如細(xì)胞群體中，有的細(xì)胞類型對(duì)病毒更為敏感，有的細(xì)胞類型能夠更為有效地支持外源基因和外源蛋白表達(dá)，有的細(xì)胞類型生長增殖速率更快，等等。所以，從細(xì)胞培養(yǎng)物中篩選和獲取具有重要生物學(xué)特性或遺傳學(xué)特性優(yōu)良的細(xì)胞株，是昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)研究的重要基礎(chǔ)性工作。從細(xì)胞群體中篩選這些具有優(yōu)良品質(zhì)的細(xì)胞是通過細(xì)胞的克隆來實(shí)現(xiàn)的。由于細(xì)胞系隨著傳代次數(shù)的增加細(xì)胞類型趨向單一（隨著傳代次數(shù)的增加，某些細(xì)胞類型成為主要優(yōu)勢(shì)細(xì)胞類群，其他細(xì)胞類型逐漸被淘汰），因此，細(xì)胞克隆主要在早期傳代細(xì)胞中進(jìn)行，傳代次數(shù)較多細(xì)胞已經(jīng)失去克隆意義?！　±ハx細(xì)胞克隆最普遍采用的方法是有限稀釋法。有限稀釋法是采用梯度倍數(shù)稀釋的原則，將細(xì)胞懸液連續(xù)倍數(shù)稀釋至極低濃度，然后接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，培養(yǎng)一段時(shí)間后可能出現(xiàn)單個(gè)細(xì)胞克隆。下面介紹有限稀釋法實(shí)驗(yàn)步驟?！　?hellip;…

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