出版時間:2009-3 出版社:化學(xué)工業(yè)出版社 作者:賈永蕊 編 頁數(shù):183
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內(nèi)容概要
本書分為三篇,原理篇主要介紹了流式細(xì)胞術(shù)的原理和質(zhì)量控制方法;操作篇詳細(xì)地介紹了流式細(xì)胞術(shù)細(xì)胞懸液的制備,以及在具體的各項應(yīng)用中流式細(xì)胞術(shù)的操作方法與技巧:常見問題解答篇采用一問一答的方式,根據(jù)編寫人員的實踐經(jīng)驗,對流式細(xì)胞術(shù)中常見的問題進(jìn)行詳細(xì)解答。 內(nèi)容涉及,應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行: 細(xì)胞周期禾口DNA倍體分析 DNA雙參數(shù)分析 凋亡檢測 腫瘤細(xì)胞多藥耐藥檢測 細(xì)胞免疫表型分析 細(xì)胞因子的測定 與同類書相比,本書更加以實際經(jīng)驗為基礎(chǔ),突出實際操作技巧,采取Step-by-Step方式進(jìn)行說明,使方法與技巧更易于掌握。 本書適用干醫(yī)藥、生命科學(xué)相關(guān)實驗室的技術(shù)人員及相關(guān)研究生。
書籍目錄
基礎(chǔ)篇 第1章 流式細(xì)胞術(shù)及其原理 1.1 流式細(xì)胞術(shù) 1.2 流式細(xì)胞儀的基本結(jié)構(gòu) 1.2.1 液流系統(tǒng) 1.2.2 光學(xué)系統(tǒng) 1.2.3 電子系統(tǒng) 1.2.4 分選系統(tǒng) 1.3 流式細(xì)胞儀的主要技術(shù)指標(biāo) 1.3.1 熒光分辨率 1.3.2 熒光靈敏度 1.3.3 前向角散射光靈敏度 1.3.4 分析/分選速度 1.3.5 分選純度 1.3.6 分選收獲率 參考文獻(xiàn) 第2章 流式細(xì)胞術(shù)的質(zhì)量控制 2.1 環(huán)境要求 2.2 儀器的校正 2.3 樣本的要求 2.4 合理設(shè)計對照 2.5 獲取實驗數(shù)據(jù)和分析 參考文獻(xiàn)操作篇 第3章 流式細(xì)胞術(shù)單細(xì)胞懸液的制備 3.1 單層培養(yǎng)細(xì)胞分散為單個細(xì)胞 3.2 新鮮實體組織分散為單個細(xì)胞 3.2.1 機(jī)械法 3.2.2 酶處理法 3.2.3 化學(xué)試劑處理法 3.3 石蠟包埋組織分散為單個細(xì)胞 3.3.1 二甲苯脫蠟法 3.3.2 組織清潔劑脫蠟法 3.3.3 甲氧一雙氧水處理法 參考文獻(xiàn) 第4章 流式細(xì)胞術(shù)的應(yīng)用 4.1 細(xì)胞周期和DNA倍體分析 4.1.1 概述 4.1.2 熒光探針 4.1.3 DNA檢測的常用術(shù)語 4.1.4 樣品制備 4.1.5 上機(jī)檢測(以PI標(biāo)記的標(biāo)本在BDFACSCalibur流式細(xì)胞儀檢測為例) 4.1.6 數(shù)據(jù)分析 4.1.7 注意事項 4.1.8 應(yīng)用舉例 4.2 DNA的雙參數(shù)分析 4.2.1 試劑 4.2.2 樣品制備 4.2.3 上機(jī)檢測 4.2.4 結(jié)果分析 4.2.5 注意事項 4.3 凋亡檢測 4.3.1 凋亡的誘導(dǎo) 4.3.2 細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)分析 4.3.3 AnnexinV凋亡檢測法 4.3.4 caspase一3分析 4.3.5 碘化丙啶(PI)單染色法 4.3.6 線粒體膜電位的檢測 4.3.7 細(xì)胞內(nèi)活性氧的檢測 4.3.8 DNA片段檢測 4.4 腫瘤細(xì)胞多藥耐藥檢測 4.4.1 細(xì)胞表面膜糖蛋白表達(dá)水平的檢測 4.4.2 羅丹明123蓄積實驗 ……常見問題解答篇
章節(jié)摘錄
插圖:實際上,G2/G1常小于2.0,這可能是因為G2期細(xì)胞的DNA一蛋白質(zhì)(染色質(zhì))聚集得更緊密或更濃縮,從而DNA染料著色時與DNA位點(diǎn)的結(jié)合能力被削弱。最常見的G2/G1是1.97。在理論上的完美的流式細(xì)胞儀上檢測時,直方圖上,S期細(xì)胞將分布在所有G-期細(xì)胞右側(cè)并一直延伸到所有G2期細(xì)胞直方圖的左側(cè)。因為.細(xì)胞一旦開始進(jìn)入S期便會開始合成DNA,并緊貼著Gl期細(xì)胞開始向外延伸,而后DNA含量不斷增加直至完成s期進(jìn)入Gz期。但是,實際中的直方圖分布并不是如此簡單,這是因為G1、G2期的DNA峰分布并非直線,而是有寬度的高斯分布,而S期分布則更寬。所形成的結(jié)果是早期S期細(xì)胞與G1期細(xì)胞相互疊加,而后期S期細(xì)胞與G2期細(xì)胞相互疊加(圖4-3)。
編輯推薦
《流式細(xì)胞術(shù)》適用干醫(yī)藥、生命科學(xué)相關(guān)實驗室的技術(shù)人員及相關(guān)研究生。
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