細(xì)胞免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)研究方法

前言

《細(xì)胞免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)研究方法》一書涵蓋了免疫細(xì)胞（包括造血干細(xì)胞和組織細(xì)胞）的分離、提取、純化、培養(yǎng)、保存、增殖、活化和凋亡，以及細(xì)胞生物學(xué)活性的實(shí)驗(yàn)技術(shù)和研究方法，讀者對象主要為普通高等醫(yī)學(xué)院校本科生和研究生，可作為學(xué)習(xí)《醫(yī)學(xué)免疫學(xué)》、《細(xì)胞生物學(xué)》和《醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)》等課程的實(shí)驗(yàn)輔助教材和研究方法工具書，同時也適用于臨床檢驗(yàn)和相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究人員閱讀。寫這本書的初衷緣于筆者攻讀研究生期間。那時，在上實(shí)驗(yàn)課和做課題時，相關(guān)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)和研究方法都是師承口授，查閱文獻(xiàn)，苦于沒有一本系統(tǒng)的指導(dǎo)性工具書。研究生畢業(yè)后，筆者結(jié)合臨床工作實(shí)踐，參考了國內(nèi)外文獻(xiàn)，編寫了這本書，希望能對相關(guān)人員提供一定的幫助。本書由淺人深，從細(xì)胞免疫研究的原理到實(shí)驗(yàn)操作步驟和試劑配制方法，逐一詳細(xì)闡述，并附有圖解和圖表，簡明易懂，是筆者從事腫瘤與血液免疫學(xué)基礎(chǔ)與臨床工作多年的心得體會。許多實(shí)驗(yàn)技術(shù)的學(xué)習(xí)和研究方法的完善，得益于在第二軍醫(yī)大學(xué)免疫學(xué)教研室期間的學(xué)習(xí)實(shí)踐。特別要感謝曹雪濤院士的言傳身教和嚴(yán)謹(jǐn)治學(xué)，感謝田野蘋教授的啟迪和鼓勵，感謝清華大學(xué)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室張明徽教授的鼎力相助。鑒于筆者學(xué)識淺薄和經(jīng)驗(yàn)受限，缺點(diǎn)和不足之處敬請同行專家批評指正。

內(nèi)容概要

全書共19章，詳細(xì)介紹了實(shí)驗(yàn)室基本設(shè)施、儀器設(shè)備、實(shí)驗(yàn)器材清洗消毒、試劑配制，細(xì)胞的提取、純化、培養(yǎng)及與細(xì)胞免疫相關(guān)的生物學(xué)活性實(shí)驗(yàn)技術(shù)和研究方法。本書內(nèi)容豐富、方法先進(jìn)，并附有大量圖解，操作簡便易行，可作為普通高等醫(yī)學(xué)院校本科生與研究生的實(shí)驗(yàn)輔助教材和工具書，也適用于臨床檢驗(yàn)和相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究人員閱讀參考。

作者簡介

　　孫黎飛，江蘇省徐州市人。1969年入伍，畢業(yè)于上海第二軍醫(yī)大學(xué)。
　　現(xiàn)任濟(jì)南軍區(qū)第148醫(yī)院腫瘤診療中心主任、碩士研究生導(dǎo)師、主任醫(yī)師。醫(yī)學(xué)碩士，濟(jì)南軍區(qū)專業(yè)技術(shù)拔尖人才。從事腫瘤免疫與血液病的實(shí)驗(yàn)室診斷與臨床工作20余年，在腫瘤免疫與血液免疫和血液病實(shí)驗(yàn)診斷與臨床治療方面有較高的造詣。曾榮獲全軍和省部級科技進(jìn)步獎、醫(yī)療成果二等獎和三等獎共6項。榮立三等功1次。兼任濟(jì)南軍區(qū)腫瘤專業(yè)委員會副主任委員、血液病專業(yè)委員會常務(wù)委員，淄博市醫(yī)學(xué)會腫瘤專業(yè)委員會副主任委員、血液病專業(yè)委員會副主任委員，淄博市醫(yī)學(xué)會特聘醫(yī)療事故鑒定專家。

書籍目錄

第1章　細(xì)胞免疫實(shí)驗(yàn)的設(shè)施和基本條件　第一節(jié)　常用無菌操作設(shè)施　第二節(jié)　常用實(shí)驗(yàn)室設(shè)備與器械　第三節(jié)　培養(yǎng)免疫細(xì)胞常用的器皿第2章  培養(yǎng)器皿的清洗、包裝與消毒第3章　細(xì)胞培養(yǎng)用液　第一節(jié)　平衡鹽溶液　第二節(jié)　常用細(xì)胞培養(yǎng)基和血清制備　第三節(jié)　其他常用培養(yǎng)液第4章　制備免疫細(xì)胞懸液　第一節(jié)　實(shí)驗(yàn)所需的材料和試劑　第二節(jié)　制備單個核細(xì)胞懸液　第三節(jié)　去除細(xì)胞懸液中的紅細(xì)胞　第四節(jié)　去除死細(xì)胞的方法　第五節(jié)　細(xì)胞計數(shù)　第六節(jié)　計算細(xì)胞活性第5章　分離與純化免疫細(xì)胞　第一節(jié)　分離人外周血細(xì)胞　第二節(jié)　分離和純化B淋巴細(xì)胞　第三節(jié)　分離和純化T淋巴細(xì)胞　第四節(jié)　純化免疫細(xì)胞亞群　第五節(jié)　分離單核細(xì)胞．巨噬細(xì)胞　第六節(jié)　分離和純化組織中的巨噬細(xì)胞　第七節(jié)　培養(yǎng)樹突狀細(xì)胞的方法第6章　建立免疫細(xì)胞克隆第7章　造血干細(xì)胞的培養(yǎng)技術(shù)第8章　用流式細(xì)胞儀檢測免疫細(xì)胞第9章　免疫細(xì)胞的增殖實(shí)驗(yàn)第10章　免疫細(xì)胞的趨化活性和抗原提呈實(shí)驗(yàn)？第11章　免疫細(xì)胞的細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)第12章　細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)第13章　制備和修飾抗體第14章　檢測與鑒定抗體的方法第15章　檢測單個B淋巴細(xì)胞分泌抗體第16章　純免疫球蛋白第17章　檢測免疫細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子第18章　細(xì)胞因子受體檢測第19章　檢測免疫細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子參考文獻(xiàn)

章節(jié)摘錄

插圖：第2章 養(yǎng)器皿的清洗、包裝與消毒在培養(yǎng)免疫細(xì)胞的過程中，任何殘留在培養(yǎng)器皿上的有害物質(zhì)（包括微生物、細(xì)胞殘余物和一些非營養(yǎng)成分的化學(xué)物質(zhì)）都會影響細(xì)胞的生長、發(fā)育及生物學(xué)活性。因此，對首次使用和重新使用的培養(yǎng)器皿都要嚴(yán)格清洗與徹底消毒。一、培養(yǎng)器皿的清洗（一）玻璃器皿培養(yǎng)用玻璃器皿的清洗一般分為以下四個步驟：浸泡、刷洗、浸酸和沖洗。1．浸泡新購置的玻璃器皿在首次使用前應(yīng)先用自來水簡單刷洗，將附著在其表面的灰塵洗去。然后再用5％稀鹽酸浸泡過夜，以中和玻璃培養(yǎng)器皿上的堿性物質(zhì)。培養(yǎng)用后的玻璃器皿表面含有大量殘存的細(xì)胞蛋白質(zhì)，應(yīng)立即用清水浸泡，以防干結(jié)后不易清洗。2．刷洗將浸泡后的玻璃器皿置入含有10％洗滌劑的塑料盆中，用優(yōu)質(zhì)的軟毛刷徹底刷洗，再用自來水反復(fù)沖洗，刷洗過程盡量不要損害器皿表面的光澤度。3．浸酸將刷洗完畢的玻璃器皿放入用濃硫酸和重鉻酸鉀按一定比例配成的清潔液中浸泡過夜。4．沖洗將浸酸過夜的培養(yǎng)皿用自來水反復(fù)、徹底沖洗，并應(yīng)顛倒沖洗至少10次以上，以防殘存的鉻離子影響細(xì)胞的生長。沖洗完畢，再將培養(yǎng)器皿置入蒸餾水中漂洗、浸泡2～3次，然后置通風(fēng)、無灰塵處晾干備用。

編輯推薦

《細(xì)胞免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)研究方法》由人民軍醫(yī)出版社出版。

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