出版時(shí)間:2008-5 出版社:科學(xué)出版社 作者:(美)奧斯伯 等主編,金由辛 等譯校 頁數(shù):1319 字?jǐn)?shù):2063000
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內(nèi)容概要
本書是知名度很高、不斷更新的《最新分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法匯編》(Current Protocols in Molecular Biologyc)系列的精編版本。新版對原有內(nèi)容進(jìn)行了修訂和更新,包括:大腸桿菌、質(zhì)粒和噬菌體,DNA的制備和分析,DNA和RNA的酶學(xué)操作,RNA的制備和分析,重組DNA文庫的構(gòu)建,重組DNA文庫的篩選,DNA序列測定,克隆化DNA的誘變,DNA導(dǎo)人哺乳動物細(xì)胞,蛋白質(zhì)分析,免疫學(xué),DNA-蛋白質(zhì)相互作用,釀酒酵母,原位雜交和免疫組織化學(xué),聚合酶鏈反應(yīng),蛋白質(zhì)的表達(dá),蛋白質(zhì)磷酸化的分析,生物信息學(xué),蛋白質(zhì)相互作用的分析等;又新增了染色質(zhì)的裝配與分析,核酸陣列,組合文庫的建立和使用,單個(gè)細(xì)胞或一群細(xì)胞問差異表達(dá)基因的發(fā)現(xiàn)和分析四章內(nèi)容。 本書可供高等院校和科研機(jī)構(gòu)從事分子生物學(xué)研究的科研工作者和研究生參考。
書籍目錄
譯者序前言第1章 大腸桿菌、質(zhì)料和噬菌體第2章 DNA的制備和分析第3章 DNA和RNA的酶學(xué)操作第4章 RNA的制備和分析第5章 重組DNA文庫的構(gòu)建第6章 重組DNA文庫的篩選第7章 DNA序列測定第8章 克隆化DNA的誘變第9章 DNA導(dǎo)入哺乳動物細(xì)胞第10章 蛋白質(zhì)分析第11章 免疫學(xué)第12章 DNA-蛋白質(zhì)相互作用第13章 釀酒酵母第14章 原位雜交和免疫組織化學(xué)第15章 聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)第16章 蛋白質(zhì)的表達(dá)第17章 蛋白質(zhì)磷酸化的分析第18章 生物信息學(xué)第19章 蛋白質(zhì)相互作用的分析第20章 染色質(zhì)的裝配與分析第21章 第核酸陣列第22章 組合文庫的建立和使用第23章 單個(gè)細(xì)胞或一群細(xì)胞間差異表達(dá)基因的發(fā)現(xiàn)和分析附錄索引
章節(jié)摘錄
第1章 大腸桿菌、質(zhì)粒和噬菌體 掌握最新的DNA操作技術(shù),需要熟悉一些相關(guān)的基本概念和實(shí)驗(yàn)技巧。本章著重介紹了大腸桿菌以及用于將DNA引入細(xì)菌的質(zhì)粒和噬菌體等載體的生物學(xué)特性和操作方法?! 〈竽c桿菌是含有長約3000 kb的環(huán)狀染色體的棒狀細(xì)菌。它能在僅含碳水化合物如葡萄糖(提供碳源和能量)和提供氮、磷及微量元素的無機(jī)鹽的極限培養(yǎng)基上快速生長(見1.1-1.3)。然而,如果用含氨基酸、核苷酸前體、維生素以及其他一些細(xì)胞不能合成的代謝成分的豐富培養(yǎng)基來培養(yǎng),那么大腸桿菌的生長會更快?! ‘?dāng)大腸桿菌在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)時(shí),其開始裂殖前,先進(jìn)入一個(gè)生長滯后期。在豐富培養(yǎng)基中,它能在20-30 min內(nèi)復(fù)制一代,這種指數(shù)生長相稱之為對數(shù)期。最后,當(dāng)培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分和氧耗盡或當(dāng)培養(yǎng)基中廢物的含量達(dá)到抑制細(xì)菌快速生長的濃度時(shí),菌體密度就達(dá)到一個(gè)比較恒定的值。在通常的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)中,這一時(shí)相的細(xì)胞密度一般為1×109-2×10。細(xì)胞/ml,細(xì)胞停止迅速分裂。這就是細(xì)菌生長的飽和期,而所謂的新鮮飽和即指當(dāng)培養(yǎng)液中細(xì)胞密度剛達(dá)到這一水平。
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