現(xiàn)代工業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)

前言

　　21世紀(jì)初，同內(nèi)外正在興起的工業(yè)生物技術(shù)，被稱為繼醫(yī)藥生物技術(shù)和農(nóng)業(yè)生物技術(shù)后的第三次生物技術(shù)革命浪潮。工業(yè)生物技術(shù)是生物學(xué)、化學(xué)和工程學(xué)的交叉技術(shù)，其核心是大規(guī)模利用微生物細(xì)胞和酶作為催化劑催化物質(zhì)轉(zhuǎn)化。我國政府已將工業(yè)生物技術(shù)列為國家中長期科學(xué)和技術(shù)發(fā)展規(guī)劃的重點(diǎn)發(fā)展領(lǐng)域，已在“十一五”規(guī)劃中給予重點(diǎn)支持?！　橛游覈I(yè)生物技術(shù)革命高潮的到來，為更好地跟上21世紀(jì)工業(yè)微生物學(xué)迅速發(fā)展的步伐，我們對原有使用了多年的《工業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)》講義作了大幅度的更新、擴(kuò)充和提高，重新編寫成《現(xiàn)代工業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》一書?！　　冬F(xiàn)代工業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》的第一章介紹了工業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用玻璃器皿和常用儀器設(shè)備的用途、結(jié)構(gòu)、性能和使用方法，并附有大量圖片。第二章至第八章為主要內(nèi)容，涵蓋了工業(yè)微生物學(xué)七大實(shí)驗(yàn)技術(shù)，共設(shè)置了44個(gè)實(shí)驗(yàn)，主要為工業(yè)微生物學(xué)基本技能訓(xùn)練實(shí)驗(yàn)，還有部分為大型綜合性實(shí)驗(yàn)和研究性實(shí)驗(yàn)。每個(gè)實(shí)驗(yàn)的編寫內(nèi)容均包括：目的要求、基本原理、實(shí)驗(yàn)器材、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及操作步驟、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)、實(shí)驗(yàn)報(bào)告及思考題等。第九章則增設(shè)了工業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的三個(gè)附錄?！　‖F(xiàn)代工業(yè)微生物學(xué)是一門實(shí)踐性很強(qiáng)的應(yīng)用生物科學(xué)。掌握工業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)對于每一位學(xué)生來說，其重要性絕不亞于理論課程。因此，在學(xué)習(xí)理論課的同時(shí)，務(wù)必注重工業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作技能的訓(xùn)練和提高?！　”緯勺鳛楦叩冉逃霭嫔缬?006年1月出版的《現(xiàn)代工業(yè)微生物學(xué)教程》（楊汝德主編，已列入“十一五”國家級規(guī)劃教材）的配套實(shí)驗(yàn)用書，頗具理工科特色，適合于理工科大學(xué)的生物工程、生物技術(shù)、生物制藥工程、食品科學(xué)與工程、食品質(zhì)量與安全、環(huán)境工程等專業(yè)的本科生作為實(shí)驗(yàn)技術(shù)用書，也適合于高等職業(yè)技術(shù)學(xué)院相關(guān)專業(yè)的?？粕褂谩！　×硗?，本書的篇幅和內(nèi)容，已大大超出工業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程規(guī)定的教學(xué)時(shí)數(shù)。各有關(guān)專業(yè)教師在使用時(shí)，可根據(jù)實(shí)際情況加以取舍或精簡，有些綜合性實(shí)驗(yàn)和研究性實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，可作為學(xué)生課外科技活動(dòng)或畢業(yè)實(shí)踐時(shí)參考使用?！　　冬F(xiàn)代工業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》由楊汝德主編。全書共分九章，其中第一章、第二章和第九章由林曉珊負(fù)責(zé)編寫；第三章至第六章由楊汝德負(fù)責(zé)編寫；第七章和第八章南吳虹負(fù)責(zé)編寫。本書在編寫過程中得到郭勇、許喜林、羅立新、潘力等多位教授的指導(dǎo)，特表示衷心謝意。由于編者的學(xué)識(shí)和水平有限，書中不當(dāng)甚至錯(cuò)誤之處在所難免，我們殷切希望廣大學(xué)子、讀者和同行給予批評指正。

內(nèi)容概要

　　《現(xiàn)代工業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》的第一章介紹了工業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用玻璃器皿和常用儀器設(shè)備的用途、結(jié)構(gòu)、性能和使用方法，并附有大量圖片。第二章至第八章為《現(xiàn)代工業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》的主要內(nèi)容，涵蓋了工業(yè)微生物學(xué)七大實(shí)驗(yàn)技術(shù)：工業(yè)微生物的顯微技術(shù)，工業(yè)微生物的形態(tài)觀察、制片及染色技術(shù)，工業(yè)微生物的純培養(yǎng)技術(shù)，工業(yè)微生物的檢測技術(shù)，工業(yè)微生物生理與發(fā)酵試驗(yàn)技術(shù)，工業(yè)微生物育種技術(shù)，工業(yè)微生物基因工程實(shí)驗(yàn)技術(shù)?！冬F(xiàn)代工業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》共設(shè)置了44個(gè)實(shí)驗(yàn)，主要為工業(yè)微生物學(xué)基本技能訓(xùn)練實(shí)驗(yàn)，還有部分為大型綜合性實(shí)驗(yàn)和研究性實(shí)驗(yàn)。　　《現(xiàn)代工業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》可作為高等教育出版社于2006年1月出版的《現(xiàn)代工業(yè)微生物學(xué)教程》（楊汝德主編）的配套實(shí)驗(yàn)用書，頗具理工科特色，適合于理工科大學(xué)的生物工程、生物技術(shù)、生物制藥工程、食品科學(xué)與工程、食品質(zhì)量與安全、環(huán)境工程等專業(yè)的本科生使用，也適合于高等職業(yè)技術(shù)學(xué)院相關(guān)專業(yè)的?？粕褂谩?/pre>



書籍目錄
前言工業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)規(guī)則與安全第一章　工業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用器皿和儀器設(shè)備第一節(jié)　工業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用的玻璃器皿第二節(jié)　工業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用的儀器設(shè)備第二章　工業(yè)微生物的顯微技術(shù)第一節(jié)　普通光學(xué)顯微鏡使用的操作技術(shù)實(shí)驗(yàn)一　使用普通光學(xué)顯微鏡觀察各種微生物標(biāo)本片第二節(jié)　暗視野顯微鏡使用的操作技術(shù)實(shí)驗(yàn)二　使用暗視野顯微鏡觀察活菌體第三節(jié)　相差顯微鏡使用的操作技術(shù)實(shí)驗(yàn)三　使用相差顯微鏡觀察啤酒酵母細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)第四節(jié)　熒光顯微鏡使用的操作技術(shù)實(shí)驗(yàn)四　使用熒光顯微鏡觀察酵母和細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)第五節(jié)　電子顯微鏡使用的操作技術(shù)實(shí)驗(yàn)五　透射電子顯微鏡微生物樣品的制備與觀察實(shí)驗(yàn)六　掃描電子顯微鏡微生物樣品的制備與觀察第三章　工業(yè)微生物的形態(tài)觀察、制片及染色技術(shù)第一節(jié)　酵母菌和霉菌的形態(tài)觀察及制片技術(shù)實(shí)驗(yàn)七　酵母菌和霉菌的制片、染色技術(shù)及形態(tài)觀察第二節(jié)　細(xì)菌和放線菌的形態(tài)觀察及制片技術(shù)實(shí)驗(yàn)八　細(xì)菌和放線菌的制片、染色技術(shù)及形態(tài)觀察實(shí)驗(yàn)九　細(xì)菌特殊結(jié)構(gòu)的制片、染色技術(shù)及形態(tài)觀察第四章　工業(yè)微生物的純培養(yǎng)技術(shù)第一節(jié)　培養(yǎng)基的配制與滅菌技術(shù)實(shí)驗(yàn)十　培養(yǎng)基的配制和滅菌第二節(jié)　無菌操作技術(shù)實(shí)驗(yàn)十　一無菌操作和微生物菌種的移接第三節(jié)　工業(yè)微生物分離與純化技術(shù)實(shí)驗(yàn)十　二微生物菌種的分離和純化實(shí)驗(yàn)十　三堿性纖維素酶產(chǎn)生菌的分離純化實(shí)驗(yàn)十　四噬菌體的分離與純化第四節(jié)　厭氧微生物純培養(yǎng)技術(shù)實(shí)驗(yàn)十五　厭氧微生物的純培養(yǎng)第五節(jié)　工業(yè)微生物菌種保藏技術(shù)實(shí)驗(yàn)十六　工業(yè)微生物菌種的保藏第五章　工業(yè)微生物的檢測技術(shù)第一節(jié)　微生物生長繁殖的測定實(shí)驗(yàn)十七　酵母菌細(xì)胞數(shù)、出芽率及死亡率測定實(shí)驗(yàn)十八　微生物細(xì)胞大小的測定實(shí)驗(yàn)十九　光電比濁計(jì)數(shù)法測定細(xì)菌生長曲線第二節(jié)　食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢測實(shí)驗(yàn)二十　水和食品中細(xì)菌菌落總數(shù)的測定實(shí)驗(yàn)二十一　水和食品中大腸菌群數(shù)的測定第三節(jié)　噬菌體的檢測技術(shù)實(shí)驗(yàn)二十二　噬菌體的檢查及其效價(jià)測定第六章　工業(yè)微生物生理與發(fā)酵試驗(yàn)技術(shù)第一節(jié)　工業(yè)微生物生理生化試驗(yàn)技術(shù)實(shí)驗(yàn)二十三　微生物對碳源的利用試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)二十四　微生物對氮源的利用試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)二十五　環(huán)境因素對微生物生長的影響試驗(yàn)第二節(jié)　工業(yè)微生物發(fā)酵試驗(yàn)技術(shù)實(shí)驗(yàn)二十六　酵母菌的乙醇發(fā)酵試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)二十七　短桿菌的谷氨酸發(fā)酵試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)二十八　枯草芽孢桿菌的a淀粉酶發(fā)酵試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)二十九　乳酸細(xì)菌的乳酸發(fā)酵試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)三十　固定化酵母細(xì)胞發(fā)酵生產(chǎn)啤酒實(shí)驗(yàn)三十一　新型固定化酵母細(xì)胞發(fā)酵生產(chǎn)乙醇實(shí)驗(yàn)三十二　正交試驗(yàn)法優(yōu)化雙歧桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基第七章　工業(yè)微生物育種技術(shù)第一節(jié)　工業(yè)微生物誘變育種技術(shù)實(shí)驗(yàn)三十三　應(yīng)用物理因素誘變選育抗藥性的淀粉酶高產(chǎn)菌株實(shí)驗(yàn)三十四　應(yīng)用化學(xué)因素誘變選育腺嘌呤營養(yǎng)缺陷型菌株第二節(jié)　工業(yè)微生物原生質(zhì)體育種技術(shù)實(shí)驗(yàn)三十五　酵母菌原生質(zhì)體誘變育種實(shí)驗(yàn)三十六　酵母菌原生質(zhì)體融合育種第八章　工業(yè)微生物基因工程實(shí)驗(yàn)技術(shù)實(shí)驗(yàn)三十七　細(xì)菌質(zhì)粒DNA的小量制備實(shí)驗(yàn)三十八　細(xì)菌總DNA的提取實(shí)驗(yàn)三十九　PCR擴(kuò)增目的基因?qū)嶒?yàn)四十　質(zhì)粒DNA的酶切及從凝膠中回收DNA實(shí)驗(yàn)四十一　感受態(tài)細(xì)胞的制備及轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)四十二　DNA體外重組實(shí)驗(yàn)四十三　葡聚糖內(nèi)切酶基因的克隆及在大腸桿菌中的表達(dá)實(shí)驗(yàn)四十四　納豆激酶基因的克隆及在酵母菌中的表達(dá)第九章　工業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)附錄附錄一　常用染色液的配制附錄二　常用試劑和溶液的配制附錄三　常用培養(yǎng)基的配方參考文獻(xiàn)


章節(jié)摘錄
　　五、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)　?。?）在莢膜負(fù)染法中，繪圖墨水用量要少，否則會(huì)完全覆蓋菌體與莢膜，造成觀察困難?！　。?）使用的載玻片，必須干凈無油跡，否則菌體與墨水混合液不能均勻鋪開。　?。?）固定及干燥時(shí)不能加熱和用熱風(fēng)吹干。應(yīng)于空氣中自然干燥，避免莢膜失水變形?！　。?）在鞭毛染色中，因老齡菌鞭毛易脫落，故宜選用處于活躍生長期菌齡的菌進(jìn)行鞭毛染色。　?。?）鞭毛染色所用載玻片必須清潔光滑、無油跡，避免因菌液散不開，菌體堆積，造成鞭毛相互糾纏且背景臟亂，難以看清鞭毛形態(tài)?！　。?）制片過程中鞭毛易脫落，故條件要溫和，不宜劇烈振蕩、涂抹菌液?！　。?）硝酸銀鞭毛染色法能否成功的關(guān)鍵環(huán)節(jié)是硝酸銀染液B染色時(shí)間的掌握?！　。?）進(jìn)行懸滴法觀察時(shí)，可用記號(hào)筆在滴加的液滴周邊畫一條短線作為標(biāo)記。觀察時(shí)先用低倍鏡聚焦記號(hào)線，再移動(dòng)凹載玻片找到液滴的位置?！　。?）使用油鏡觀察懸滴片時(shí)，蓋玻片厚度不能超過0.17 mm。在操作時(shí)應(yīng)十分細(xì)心，避免壓碎蓋玻片?！　。?0）因活細(xì)胞是透明的，故在進(jìn)行懸滴法觀察時(shí)應(yīng)適當(dāng)減低視野亮度，以增大反差?！　。?1）細(xì)菌芽孢加熱染色時(shí)，必須維持在染液微冒蒸汽的狀態(tài)，不宜沸騰?！　。?2）加熱時(shí)使用載玻片夾或試管夾，以免燙傷；使用染料時(shí)注意避免沾到衣物上。　　六、實(shí)驗(yàn)報(bào)告與思考題　　1.實(shí)驗(yàn)結(jié)果　?。?）繪圖并描述腸膜明串珠菌菌體及莢膜形態(tài)特征?！　。?）繪圖并描述普通變形桿菌菌體形態(tài)特征及鞭毛數(shù)量、形狀、著生方式等。　?。?）繪圖并描述枯草芽孢桿菌的芽孢形狀、著生位置及芽孢囊形態(tài)特征。








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