酵母遺傳學方法實驗指南

前言

　　酵母菌是一種單細胞真核生物。它既有一切真核細胞生命活動最基本的重要特征，又有實驗微生物所具備的背景清楚、生長迅速、易于操作等許多優(yōu)點。現(xiàn)今遺傳學、生物化學和細胞生物學中的許多規(guī)律性認識都是以酵母為研究材料得出的。酵母菌是世界上首個被測出基因組DNA全序列的真核生物，在其6607個可讀框（ORF）中已有4752個得到了證實，其中許多是與細胞基本生命活動密切相關(guān)的重要基因，在結(jié)構(gòu)與功能方面與高等真核生物有很強的進化保守性。至今已發(fā)現(xiàn)有約300種蛋白質(zhì)在人與酵母中是同等功能的，其中許多與人類疾病相關(guān)蛋白是類似的。因此，以酵母為模型研究高等真核生物的重要生理功能和疾病發(fā)生發(fā)展的分子機理，以及尋找藥物作用靶點等都有其獨特的優(yōu)勢。此外，基于酵母菌研究的模式生物技術(shù)（如基因敲除、基因功能補償和酵母雙雜交技術(shù)等）在生命科學的研究中，尤其是在后基因組時代對基因功能的研究中，得到了廣泛的應用。隨著當代生命科學的發(fā)展，酵母菌作為一種模式生物的實用性和高效性在科研實踐中得到了充分體現(xiàn)。　　美國冷泉港實驗室（Cold Spring Harbor Laboratory）被稱為世界生命科學的圣地與分子生物學的搖籃，為全球影響最大的十大研究機構(gòu)之一}同時，冷泉港實驗室還是國際生命科學的會議中心與培訓基地，經(jīng)過這里培訓的優(yōu)秀科學家如今已遍布全球各地?！督湍高z傳學方法實驗指南》就是冷泉港實驗室組織該領域知名學者合編的一本培訓教程，迄今已有47年的歷史，其問已更新再版多次，以及時適應這個領域的最新進展。本教程最大的特點在于其權(quán)威性、全面性和可操作性，它將酵母經(jīng)典遺傳學和分子生物學實驗的基本原理與操作方法都做了詳盡的介紹。因此，無論對于專業(yè)科研人員還是初學者，都是一本不可多得的必備參考書?！　⑴c本書翻譯的人員主要是正在從事酵母遺傳學和分子生物學工作的研究生和博士后，由于譯者的翻譯水平有限，譯文中難免存在錯誤和不妥之處，敬請讀者批評指正。

內(nèi)容概要

本書作為冷泉港實驗室出版社的經(jīng)典酵母實驗教程的第二版，收錄了酵母研究中最常用的減數(shù)分裂作圖、轉(zhuǎn)化、基因置換等11個實驗，以及酵母蛋白抽提、活體染色、RNA分離等28種技術(shù)方法。文字簡潔明了，內(nèi)容全面而詳細，兼顧經(jīng)典和前沿，是該領域的權(quán)威之作。    適合于大學院校、科研單位的教師、學生及研究人員作為實驗指導書，亦可供從事酵母相關(guān)生物制品行業(yè)的科技人員參考。

書籍目錄

譯者序原著序前言遺傳學命名法實驗篇  實驗一  酵母細胞的觀察  實驗二  營養(yǎng)缺陷型、溫度敏感型和滲透壓敏感型突變株的分離和鑒別  實驗三  減數(shù)分裂作圖  實驗四  有絲分裂重組和隨機孢子分析  實驗五  酵母轉(zhuǎn)化  實驗六  合成致死突變體  實驗七  基因置換  實驗八  ras2抑制基因的分離  實驗九  細胞型操作  實驗十  用插入誘變法分離突變體  實驗十一  利用雙雜交差異互作篩選以分離功能突變體技術(shù)和方案篇  技術(shù)和方案1  酵母的高效轉(zhuǎn)化  技術(shù)和方案2  快速粗放的酵母菌落質(zhì)粒轉(zhuǎn)化法  技術(shù)和方案3  酵母DNA分離  技術(shù)和方案4  酵母蛋白質(zhì)的抽提  技術(shù)和方案5  TAP純化方法  技術(shù)和方案6  酵母RNA的分離  技術(shù)和方案7  質(zhì)粒DNA的羥胺突變  技術(shù)和方案8  酵母β-半乳糖苷酶的測定  技術(shù)和方案9  羧肽酶Y的平板鑒定  技術(shù)和方案10  隨機孢子分析  技術(shù)和方案11  酵母活細胞染色  技術(shù)和方案12  酵母免疫熒光法  技術(shù)和方案13  已固定細胞的肌動蛋白染色  技術(shù)和方案14  PCR介導基因破壞法  技術(shù)和方案15  酵母菌落PCR  技術(shù)和方案16  分光光度法測酵母細胞密度  技術(shù)和方案17  細胞同步化  技術(shù)和方案18  染色質(zhì)免疫沉淀  技術(shù)和方案19  酵母DNA流式細胞記數(shù)  技術(shù)和方案20  對數(shù)生長  技術(shù)和方案21  EMS誘變  技術(shù)和方案22  四分體解剖  技術(shù)和方案23  制備四分體解剖針  技術(shù)和方案24  挑取合子  技術(shù)和方案25  測定鋪板效率  技術(shù)和方案26  小量提取E.coli DNA  技術(shù)和方案27  E.coli感受態(tài)的制備與轉(zhuǎn)化  技術(shù)和方案28  系統(tǒng)缺失菌株的保存及操作附錄A  培養(yǎng)基附錄B  菌株保存附錄C  酵母遺傳圖譜和物理圖譜附錄D  平板劃線模板附錄E  菌株核型分析電泳的Southern印跡作圖附錄F  菌株附錄G  用標準血球計數(shù)板進行酵母細胞計數(shù)附錄H  四分孢子計分表

編輯推薦

　　美國冷泉港實驗室被稱為世界生命科學的圣地與分子生物學的搖籃，為全球影響最大的十大研究機構(gòu)之一?！督湍高z傳學方法實驗指南》就是冷泉港實驗室組織該領域知名學者合編的一本培訓教程，迄今已有47年的歷史，其間已更新再版多次，以及時適應這個領域的最新進展。本教程最大的特點在于其權(quán)威性、全面性和可操作性，它將酵母經(jīng)典遺傳學和分子生物學實驗的基本原理與操作方法都做了詳盡的介紹。因此，無論對于專業(yè)科研人員還是初學者，都是一本不可多得的必備參考書。

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