蛋白質(zhì)理論與技術(shù)

前言

21世紀(jì)是生命科學(xué)飛速發(fā)展的時(shí)代。如果說20世紀(jì)后半葉是信息時(shí)代，那么21世紀(jì)上半葉，生命科學(xué)將成為主宰。隨著我國加入WTO后與世界科技日益接軌，技術(shù)的競爭已呈現(xiàn)出其核心地位和作用。正是在此背景下，為適應(yīng)我國21世紀(jì)生物技術(shù)發(fā)展和需求，科學(xué)出版社組織編寫了這套融基礎(chǔ)理論和實(shí)踐技術(shù)為一體、獨(dú)具特色、主要面向一線科技人員的學(xué)術(shù)著作——《21世紀(jì)生物技術(shù)叢書》。本套叢書共有八本，包括《組織細(xì)胞化學(xué)理論與技術(shù)》、《神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)理論與技術(shù)》、《蛋白質(zhì)理論與技術(shù)》、《分子雜交理論與技術(shù)》、《PCR理論與技術(shù)》、《基因克隆理論與技術(shù)》、《抗體理論與技術(shù)》、《干細(xì)胞理論與技術(shù)》。自2005年3月本套叢書問世以來，即得到了廣大生物技術(shù)科技工作者的喜愛，2006年1月即進(jìn)行了重印。本套叢書對滿足日益擴(kuò)大的研究生實(shí)踐需求，以及我國21世紀(jì)生物技術(shù)的普及和發(fā)展起到了積極的促進(jìn)作用。由于生物技術(shù)發(fā)展迅速和需求日益擴(kuò)大，本套叢書于2009年再版。第二版在第一版的基礎(chǔ)上，主要對實(shí)驗(yàn)技術(shù)進(jìn)行了全面增補(bǔ)和修訂，新增內(nèi)容20余章。補(bǔ)充了神經(jīng)形態(tài)示蹤、腫瘤干細(xì)胞培養(yǎng)、神經(jīng)干細(xì)胞移植、轉(zhuǎn)基因干細(xì)胞構(gòu)建、抗體封閉、細(xì)胞凋亡染色、免疫熒光染色、蛋白質(zhì)組和基因組等實(shí)用技術(shù)，并對各技術(shù)的相關(guān)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行了更全面的總結(jié)。叢書從形態(tài)、細(xì)胞、分子生物學(xué)三個(gè)層面介紹了目前常用生物技術(shù)的基本理論、進(jìn)展及其相關(guān)技術(shù)與應(yīng)用。從培養(yǎng)科學(xué)思維能力和科研工作能力的目標(biāo)出發(fā)，以實(shí)用性和可操作性為目的，面向我國日益增多的研究生和廣大的一線科研人員。在編寫方式和風(fēng)格方面，力求強(qiáng)調(diào)基本概念和理論的闡述，注重基本技術(shù)的實(shí)踐，并提供了大量原版彩圖及實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)體會(huì)，使叢書更具實(shí)用價(jià)值。本套叢書由我國神經(jīng)科學(xué)青年專家王廷華教授牽頭，邀請國內(nèi)外一批知名專家教授參加編寫和審閱。本套叢書是全體參編人員實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的總結(jié)，對從事科研的研究生和一線研究人員有很好的參考價(jià)值。由于時(shí)間有限，加之科學(xué)技術(shù)發(fā)展迅速，錯(cuò)誤和不足之處在所難免，懇請各位讀者批評指正。值本套叢書出版之際，感謝為我國生物技術(shù)及科學(xué)發(fā)展孜孜不倦、奉獻(xiàn)一生的老一輩科學(xué)家，是他們的指導(dǎo)、培養(yǎng)和杰出工作為我國中青年一代的發(fā)展奠定了基礎(chǔ)。感謝國內(nèi)外一批知名專家教授組成的編審委員會(huì)對叢書的認(rèn)真審閱，感謝編者們所付出的辛勤勞動(dòng)。感謝中國解剖學(xué)會(huì)對本套叢書的組織工作給予的支持。感謝各位同道給予的鼓勵(lì)和關(guān)心。

內(nèi)容概要

蛋白質(zhì)理論與技術(shù)是21世紀(jì)生物技術(shù)發(fā)展的一項(xiàng)重要基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)性科學(xué)，是科學(xué)研究的重要理論和工具?！兜鞍踪|(zhì)理論與技術(shù)》是《21世紀(jì)生物技術(shù)叢書》的一個(gè)分冊。該書的第一版于2005年出版，隨著當(dāng)今生物技術(shù)的迅速發(fā)展和需求的日益擴(kuò)大，現(xiàn)予以再版。第二版在第一版基礎(chǔ)上，補(bǔ)充了蛋白質(zhì)組考馬斯亮藍(lán)染色和銀染色技術(shù)及差異蛋白的質(zhì)譜鑒定技術(shù)，內(nèi)容由第一版的14章增至第二版的17章，從而使該書更全面和更具實(shí)用價(jià)值。    本書分上、下篇。上篇系統(tǒng)介紹了蛋白質(zhì)的合成、轉(zhuǎn)運(yùn)、加工與修飾、結(jié)構(gòu)和功能，闡述了蛋白質(zhì)分離純化的基本理論，蛋白質(zhì)定性、定量檢測的基本理論，并對蛋白質(zhì)的生物信息學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)和蛋白質(zhì)芯片理論與進(jìn)展做了介紹。下篇介紹了蛋白質(zhì)樣品的準(zhǔn)備、蛋白質(zhì)電泳技術(shù)、層析技術(shù)、蛋白質(zhì)活性及定性和定量檢測的方法與應(yīng)用，并在生物信息學(xué)預(yù)測蛋白質(zhì)序列技術(shù)方面進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)性闡述。此外，對最近較為熱門的蛋白質(zhì)組技術(shù)包括考馬斯亮藍(lán)染色、銀染色及質(zhì)譜分析技術(shù)進(jìn)行了實(shí)例介紹。    本書可供生物醫(yī)學(xué)專業(yè)研究生、本科生及從事蛋白質(zhì)研究的科研人員閱讀和實(shí)驗(yàn)時(shí)參考。

書籍目錄

上篇  蛋白質(zhì)理論  第一章  蛋白質(zhì)研究歷史回顧    第一節(jié)  蛋白質(zhì)研究的初級階段    第二節(jié)  蛋白質(zhì)研究的發(fā)展階段    第三節(jié)  蛋白質(zhì)研究的分子生物學(xué)階段  第二章  蛋白質(zhì)的合成、轉(zhuǎn)運(yùn)、加工與修飾    第一節(jié)  蛋白質(zhì)的合成    第二節(jié)  蛋白質(zhì)合成后的定向輸送    第三節(jié)  蛋白質(zhì)合成后的加工與修飾  第三章  蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能    第一節(jié)  蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)概念的提出    第二節(jié)  蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)生物學(xué)    第三節(jié)  蛋白質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)單位    第四節(jié)  蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)    第五節(jié)  蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)    第六節(jié)  蛋白質(zhì)超二級結(jié)構(gòu)和結(jié)構(gòu)域    第七節(jié)  蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)和四級結(jié)構(gòu)    第八節(jié)  蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能  第四章  蛋白質(zhì)分離純化的基本理論    第一節(jié)  蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)    第二節(jié)  利用溶解度差別分離蛋白質(zhì)的方法    第三節(jié)  利用分子大小不同的分離純化方法    第四節(jié)  電泳技術(shù)    第五節(jié)  蛋白質(zhì)化學(xué)中的層析技術(shù)  第五章  蛋白質(zhì)定性定量檢測的基本理論    第一節(jié)  免疫組織化學(xué)的基本原理    第二節(jié)  蛋白質(zhì)定量檢測原理    第三節(jié)  免疫印跡法分析特定蛋白質(zhì)的相對含量  第六章  蛋白質(zhì)的生物信息學(xué)理論    第一節(jié)  蛋白質(zhì)生物信息學(xué)的概念及內(nèi)容    第二節(jié)  Internet網(wǎng)上的生物信息學(xué)資源    第三節(jié)  序列對比和數(shù)據(jù)庫搜索  第七章  蛋白質(zhì)組學(xué)理論與進(jìn)展    第一節(jié)  蛋白質(zhì)組學(xué)的基本概念及歷史回顧    第二節(jié)  蛋白質(zhì)組學(xué)研究的技術(shù)平臺(tái)    第三節(jié)  蛋白質(zhì)組學(xué)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用與展望  第八章  蛋白質(zhì)芯片理論與進(jìn)展下篇  蛋白質(zhì)技術(shù)  第九章  蛋白質(zhì)樣品的準(zhǔn)備    第一節(jié)  分離純化蛋白質(zhì)樣品的方法    第二節(jié)  蛋白質(zhì)樣品的儲(chǔ)存與運(yùn)輸  第十章  蛋白質(zhì)電泳技術(shù)    第一節(jié)  概述    第二節(jié)  電泳的基本原理    第三節(jié)  聚丙烯酰胺凝膠電泳    第四節(jié)  SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳    第五節(jié)  聚丙烯酰胺凝膠雙相電泳——2D電泳    第六節(jié)  毛細(xì)管電泳  第十一章  蛋白質(zhì)層析技術(shù)    第一節(jié)  層析技術(shù)的基本原理及分類    第二節(jié)  柱層析    第三節(jié)  高效液相色譜法  第十二章  蛋白質(zhì)的定量檢測    第一節(jié)  紫外可見分光光度法    第二節(jié)  熒光分光光度法    第三節(jié)  HPLC、CE分離定量    第四節(jié)  酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)  第十三章  生物信息學(xué)預(yù)測蛋白質(zhì)序列技術(shù)    第一節(jié)  概述    第二節(jié)  蛋白質(zhì)識別與描述    第三節(jié)  蛋白質(zhì)序列的物理性質(zhì)計(jì)算    第四節(jié)  蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)和折疊類型分析    第五節(jié)  特殊結(jié)構(gòu)或特征性結(jié)構(gòu)的預(yù)測    第六節(jié)  三級結(jié)構(gòu)的預(yù)測    第七節(jié)  蛋白質(zhì)的質(zhì)譜鑒定  第十四章  蛋白質(zhì)技術(shù)的應(yīng)用    第一節(jié)  蛋白質(zhì)生物活性檢測方法之一——用細(xì)胞釣蛋白技術(shù)檢測備用根貓脊髓背角內(nèi)神經(jīng)營養(yǎng)因子的生物活性    第二節(jié)  蛋白質(zhì)生物活性檢測方法之二——凝膠小塊與背根節(jié)  聯(lián)合培養(yǎng)法    第三節(jié)  Westem印跡技術(shù)在檢測雞胚脊髓內(nèi)神經(jīng)營養(yǎng)因子中的應(yīng)用    第四節(jié)  牛腦W-100蛋白的純化與鑒定  第十五章  大鼠皮質(zhì)額葉雙相電泳實(shí)驗(yàn)條件的建立    第一節(jié)  實(shí)驗(yàn)原理    第二節(jié)  實(shí)驗(yàn)所需設(shè)備、試劑及其配制    第三節(jié)  實(shí)驗(yàn)步驟    第四節(jié)  實(shí)驗(yàn)結(jié)果    第五節(jié)  實(shí)驗(yàn)體會(huì)  第十六章  快速老化小鼠額葉皮質(zhì)蛋白質(zhì)組學(xué)的考馬斯亮藍(lán)染色技術(shù)    第一節(jié)  實(shí)驗(yàn)原理    第二節(jié)  實(shí)驗(yàn)所需設(shè)備、試劑及其配制    第三節(jié)  實(shí)驗(yàn)步驟    第四節(jié)  實(shí)驗(yàn)結(jié)果    第五節(jié)  實(shí)驗(yàn)體會(huì)  第十七章  針刺促進(jìn)脊髓可塑性的蛋白質(zhì)組銀染色技術(shù)與差異蛋白的質(zhì)譜鑒定    第一節(jié)  實(shí)驗(yàn)原理    第二節(jié)  實(shí)驗(yàn)所需設(shè)備、試劑及其配制    第三節(jié)  實(shí)驗(yàn)步驟    第四節(jié)  實(shí)驗(yàn)結(jié)果    第五節(jié)  實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析彩圖

章節(jié)摘錄

上篇 蛋白質(zhì)理論第一章 蛋白質(zhì)研究歷史回顧生物學(xué)是研究生命現(xiàn)象、生命本質(zhì)、生命活動(dòng)及其規(guī)律的科學(xué)。生物學(xué)發(fā)展到今天，已經(jīng)在分子水平、細(xì)胞水平和整體水平三個(gè)層次上研究生命活動(dòng)及其規(guī)律。生命科學(xué)發(fā)生巨變，起于20世紀(jì)之初。由于化學(xué)、物理和數(shù)學(xué)領(lǐng)域的廣泛滲透，給現(xiàn)代生命科學(xué)奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。特別是1953年，Watson和Crick借助幾個(gè)實(shí)驗(yàn)室的研究成就，根據(jù)DNA的x線衍射圖譜，由A、T、G、C的物理化學(xué)數(shù)據(jù)，建立了DNA雙螺旋模型。之后，從20世紀(jì)70年代開始，分子生物學(xué)逐步形成，使生命科學(xué)進(jìn)入了嶄新的階段，從而在本質(zhì)上揭示生命活動(dòng)的真諦。 構(gòu)成生命活動(dòng)最重要的物質(zhì)無疑是蛋白質(zhì)和核酸，每一生命活動(dòng)都是由基因表達(dá)產(chǎn)物——蛋白質(zhì)的特定群體來執(zhí)行。在生命科學(xué)探索的長征途中，“蛋白質(zhì)組”研究的時(shí)代已經(jīng)到來。此外，蛋白質(zhì)是生物體的基本組成成分之一，也是含量最豐富的高分子物質(zhì)，約占人體固體成分的45％。生物體內(nèi)蛋白質(zhì)的分布較為廣泛，幾乎所有組織、器官都含有蛋白質(zhì)。第一節(jié) 蛋白質(zhì)研究的初級階段18世紀(jì)中葉至20世紀(jì)初是生物化學(xué)的初級階段，主要研究了生物體的化學(xué)組成，特別是對氨基酸、糖類及脂類的性質(zhì)進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究?；瘜W(xué)合成簡單的多肽、酵母發(fā)酵過程、生物體內(nèi)的各種化學(xué)反應(yīng)等，幾乎都是在特異的生物酶的催化下完成的。

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